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单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级PCR基因扩增一实验目的通过本实验学习PCR反应的基本原理与实验技术二实验原理PCR是一种由引物介导的选择性体外扩增DNA的方法由美国人B.Mullis于1983年发明包括三个基本步骤:变性(Denature):目的双链DNA片段在94℃下解链退火(Ann
聚合酶链式反应(PCR)及酶切鉴定转化产物 一、实验目的二、实验原理三、实验试剂四、实验步骤五、注意事项讲授内容学习和掌握PCR的基本原理和实验技术学习和掌握限制性内切酶双酶切鉴定转化产物的基本原理和实验技术掌握琼脂糖凝胶电泳的基本原理和实验技术一、实验目的聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种通过体外酶促反应大量、快速、选择性地合成目的DNA片段的核
菌物研究2003 , 1 (1)
第 13 卷 第 1 期
PCR(Polymerase Chain Reaction聚合酶链反应)是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法.它包括三个基本步骤:(1) 变性(Denature):目的双链DNA片段在94℃下解链(2) 退火(Anneal):两种寡核苷酸引物在适当温度(50℃左右)下与模板上的目的序列通过氢键配对(3) 延伸(Extension):在Taq DNA聚合酶合成DNA的最适温度下以目的DNA为模板
聚合酶链式反应(PCR)扩增DNA片段一实验目的1.学习PCR基因扩增的基本原理和操作方法2.理解PCR基因扩增在分子生物实验技术中的重要性3.了解引物设计的一般要求二实验原理多聚酶链式反应(Polymerase Chain Reaction PCR ):原理类似于DNA的变性和复制过程即在高温(93-95℃)下待扩增的靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板而后在低温(3765℃)情况下
扩增已知序列旁邻的未知DNA序列的高效TAIL-PCR方法(hiTAIL-PCR)扩增已知序列旁邻的未知DNA序列的高效TAIL-PCR方法High-efficient thermal asymmetric interlaced PCR (hiTAIL-PCR)Want to mining unknown sequences quicklyJust hi-TAIL it!?引子: 扩增已知序列
琼脂糖凝胶电泳常用于临床检测(定性)聚丙烯酰胺凝胶电泳分离效果比琼脂糖好条带比较集中可用于科研及检测分析二甲苯青:水溶液呈兰色电泳时其迁移速率与双链线性DNA大致相当指示剂一般与蔗糖甘油或聚蔗糖400组成载样缓冲液作用:①增加样品密度使其比重增加以确保DNA均匀沉入加样孔内②在电泳中形成肉眼可见的指示带可预测核酸电泳的速度和位置③使样品呈色使加样操作更方便普通电泳仪高压电泳仪紫外仪上观察电泳带及其
6将上清液转移到一个新离心管中加 mL 异丙醇 充分混匀 12000 g 离心 5 min (4 ℃ )7去掉上清加入 mL 70 乙醇颠倒离心管数次 12000 g 离心 1 min(4℃)8去掉上清空气中干燥 DNA沉淀 15 min9将DNA沉淀溶解于 100 μL TE 或水中10浓度和纯度测定: OD260OD280= 1 OD260= 50 μg mL
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