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单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级第二章 基因工程制药第一节 概 述第二节 目的基因的获得第三节 基因表达第四节 基因工程菌的不稳定性第五节 基因工程菌中试第六节 重组工程菌的培养第七节 基因工程药物的分离纯化第八节 变性蛋白的复性第九节 基因工程药物的质量控制 第二章
二真核生物基因的组成2.构建基因组文库的基本步骤 为了最大限度地保证基因在克隆过程中的完整性 用于基因组文库构建的DNA在分离纯化操作中应尽量避免过度的断裂制备的DNA分子量越大经切割处理后样品中含有不规则末端的DNA片段的比率就越低重组率和完备性也就越高原理:以第一链合成产物cDNA:mRNA杂交体作 为切口平移的模板RNA酶H在杂交体的
基因工程制药陈芳允中国科学院院士著名电子学家首次进入市场时间人生长激素(HGH)1985日本治疗中性白细胞减少症成品检定工程菌大规模发酵最佳参数的确立新型生物反应器的研制高效分离介质及装置的开发分离纯化的优化控制高纯度产品的制备技术生物传感器等一系列仪器仪表的设计和制造电子计算机的优化控制等工程菌(或细胞)构建中重要的工具PCR扩增仪一化学合成法ds-cDNA(二)外源基因导入真核细胞原理:载体带
(4)凝胶过滤色谱凝胶过滤是以具有空隙大小一定的多孔性凝胶作为分离介质小分子能进入孔内在柱中缓慢移动而大分子不能进入孔内快速移动利用这种移动差别可使大分子与小分子分开3非蛋白质类杂质的去除非蛋白质类杂质不应忽视在纯化过程中需特别注意3种可能存在的非蛋白类杂质它们是DNA热原质和病毒常用的分离纯化方法见表3—4(1)DNA的去除(2)热原质的去除(3)病毒的去除三纯化工艺过程的质量控制产品要有足够的
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级二利用PCR扩增目的基因1.巢式PCR(nested PCR) 巢式PCR是指利用两对PCR引物(巢式引物)进行两轮PCR扩增反应 在第一轮扩增中外引物用以产生扩增产物此产物在内引物的存在下进行第二轮扩增 由于巢式PCR反应有两次PCR扩增从而降低了扩增多个靶位点的可能性(
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级第九节 基因工程药物的质量控制 是利用活细胞作为表达系统产物的分子量较大并有复杂的结构还参与生理功能的调节用量极微任何质和量的偏差都可贻误病情造成严重危害 宿主细胞中表达的外源基因在转录翻译精制工艺放大过程中都可能发生变化故从原料以及制备全过程都必须严格控制条件和鉴定质量一 原材料的质量控制 原材
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级第四章 基因工程制药在制药业中医药产业经历了3 个不同的历史阶段:天然药物通过化学方法合成的药物基因工程药物基因工程药物3 个阶段:其一是细菌基因工程即把目的基因通过适当的改建导入大肠杆菌中再通过细菌等原核微生物表达的目的蛋白作为药物其二是细胞基因工程药物这是把人或哺乳动物的基因直接导入哺乳动物的细胞中生产有生物活性的产品其
第三十一讲授课内容第六章 基因工程制药技术第一节 基因工程概述第二节 基因工程制药实用技术授课时数2教学目标了解基因工程及基因工程制药的概况教学重点基因工程与制药的概念及关系教学难点基因工程制药的特点教材教具教学内容(含教学步骤时间分配教法学法作业布置等)导入新课:基因工程是与医药产业结合非常密切的高新技术它的发展为医药工业的发展开辟了广阔的前景下面便介绍基因工程载医药生产中应用的几个侧面以
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