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酶的化学修饰生物工程前沿化学修饰的分类及意义几种侧链基团的重要反应化学修饰的定量处理化学修饰应用举例酶的化学修饰化学修饰的作用探测蛋白质必需基团的性质和数目用于蛋白质纯度鉴定用于蛋白质一级结构的测定用于蛋白质分子构象变化及运动性利用亲和标记探测活性部位局部构象变化利用交联反应研究寡聚蛋白质亚基之间的排列及受体与激素的相互作用蛋白质单晶的同晶置换:X-晶体衍射固定化酶改造蛋白质的性质化学修饰的专一性
1概念凡通过化学基团的引入或除去而使蛋白质(酶)共价结构发生改变从而改变蛋白质(酶)的某些特性和功能的过程都可称蛋白质(酶)的化学修饰2)小分子修饰:用化学小分子修饰酶的表面基团(如:对酶分子的侧链基团尤其酶活性中心的必需基团进行化学修饰)二化学修饰的机理 天然蛋白质通过氢键来维持其稳定性也是使pK发生改变的一个因素例如2-氟酚的pK比2-溴酚的pK高这是由于氟与酚基形成氢键的能力比溴强水杨酸的羧
4)如何消除酶的抗原性及稳定酶的微环境A. 酶蛋白氨基酸组成的抗原决定簇与修饰剂形成了共价键 破坏了抗原决定簇——抗原性降低乃至消除 遮盖了抗原决定簇——阻碍抗原抗体结合B. 大分子修饰剂本身是多聚电荷体能在酶分子表面形成缓冲外壳抵御外界环境的极性变化维持酶活性部位微环境相对稳定1)-NH2的化学修饰(主要用于赖氨酸的修饰)1)PEG的修饰(常采用单甲氧基MPEG的衍生物)4肽链的有限水解
固定化酶是被固定在某一有限空间内不再能自由流动而仍有催化活性的酶固定化酶的缺点微胶囊结合力弱对pH离子强度温度等因素敏感酶易脱落酶的装载容量较小各种酶固定化方法的比较结合基团
Chapter 4 Modification of Enzyme Molecule酶的分子修饰Contents of chapter 41、什么是酶分子修饰2、酶分子修饰的基本要求和条件3、酶分子的修饰方法4、酶修饰后的性质变化GoGoGoGo5、酶的定向进化Go41 什么是酶分子修饰?通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变,从而改变酶的某些特性和功能的技术过程称为酶分子修饰。即:在体外将酶分子通
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菠萝蛋白酶的提取纯化及化学修饰对其活性的影响实验研究内容:菠萝蛋白酶活力测定方法的确定菠萝蛋白酶的稳定性研究菠萝蛋白酶的纯化菠萝蛋白酶的修饰修饰酶与修饰酶的活力比较参考文献:《提取菠萝酶工艺的研究》——胡莉娟杨凌职业技术学院药物工程系《菠萝蛋白酶的提取及其在医药中的应用》——李淑喜黎新明《不同金属离子对菠萝蛋白酶活性及热稳定性的影响》——曾霖霖黄惠华《聚乙二醇对菠萝蛋白酶的化学修饰》——吉林大学生
level酶的化学本质结构和特性酶的作用动力学酶的作用机理酶的应用别构酶共价调节酶同工酶等的概念 性质生物学意义辅基 结合紧密不易分离2H2O2酶作用的专一性1根据酶蛋白分子的特点将酶分成三类 1.氧化还原酶类(oxido-reductases) :催化性质天S甘胰蛋白酶S E→ ES → E P酶活力的测定: 1. 酶活力: 指酶催化一定化学反应的能力 用酶所催化的某
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级酶 的 组 织 化 学Enzyme histochemistry一. 概述酶是生物体内具有催化作用的特殊蛋白质酶的组织化学 利用细胞内的酶具有催化底物的特性并通过显色反应在切片或涂片上显示组织或细胞中内源性酶的活性及其定位的方法 酶组织化学发展历史1868年 Klebs 组化1939年 TakamatsuGo
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