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在 细菌等原核生物中相同的RNA聚合酶催化三种RNA的合成: 信使RNA?(mRNA) javascript:innerlink(22E6A0B8E7B396E4BD93RNA2022) o 词条核糖体RNA 不存在点击可创建 核糖体RNA?(rRNA)及 转运RNA?(tRNA)?细胞RNA聚合酶是相对大的分子 细菌RNA聚合酶是相对大的分子核心酶有5个亚基(400
RNA的聚合酶链式反应:目前常用的RNA检测方法有原位杂交点杂交Northern印记杂交以及核酸酶保护试验等这些方法的普遍缺点是难以检测低丰度的信使RNA并且操作繁琐将RNA反转录和PCR结合起来建立RNA聚合酶链式反应(RT-PCR)则可以克服上述缺点RT-PCR先在反转录酶的作用下以信使RNA为模板合成cDNA再以CDNA为模板进行PCR反应此法快速简便并且灵敏度高此法可以检测单个细胞中
DNA聚合酶和DNA连接酶的比较比较项目DNA聚合酶DNA连接酶??不?同?点形成磷酸二酯键的方式只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核酸片段的3末端的羟基上形成磷酸二酯键是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键不是在单个脱氧核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键是否需要模板以一条DNA链为模板将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来因DNA连接酶不
DNA聚合酶和DNA连接酶的比较比较项目DNA聚合酶DNA连接酶??不?同?点形成磷酸二酯键的方式只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核酸片段的3末端的羟基上形成磷酸二酯键是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键不是在单个脱氧核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键是否需要模板以一条DNA链为模板将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来因DNA连接酶不需要模
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Taq DNA聚合酶存在于水生嗜热菌(Thermus aquaticus)的嗜热DNA聚合酶可在74℃复制DNA在95℃仍具有酶活力该酶可在离体条件下以DNA为模板延伸引物合成双链DNA这个酶只有5′→3′DNA聚合酶活性和5′→3′的外切酶活性缺少3′→5′的外切酶活性即具有5-3DNA聚合酶活性和对双链DNA特异的5-3外切核酸酶活性无3-5外切酶活性使用该产品扩增得到的PCR产物的3末端附有
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酶作为生物催化剂的特点:1用量少而催化效率高2专一性高3反应条件温和 4可调节性影响酶催化作用的因素:1底物浓度对酶促反应速度的影响在低底物浓度时 反应速度与底物浓度成正比表现为一级反应特征当底物浓度达到一定值几乎所有的酶都与底物结合后反应速度达到最大值(Vmax)此时再增加底物浓度反应速度不再增加表现为零级反应2. pH 的影响 在一定的pH 下 酶具有最大的催化活性通常称此pH 为最适 pHp
酶作为生物催化剂的特点3:酶具有高度专一性有些酶的专一性是由激素调控的乳腺组织合成乳糖是一个明显的例子哺乳动物乳腺组织合成乳糖是由乳糖合成酶催化的该酶由两个亚基即催化亚基和调节亚基组成催化亚基单独存在时不能催化合成乳糖但能催化半乳糖以共价键的方式连接到蛋白质上形成糖蛋白调节实际上就是乳汁中的α-乳清蛋白其本身无催化活性但当催化亚基结合后就可以改变催化亚基的专一性催化半乳糖和葡萄糖反应生成乳糖:UD
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