实验三 酵母蔗糖酶的部分纯化与纯度测定?酶的纯化一原理酵母中含有丰富的蔗糖酶()本实验以酵母为原料通过破碎细胞热处理乙醇沉淀离子交换柱层析等步骤提取蔗糖酶并用聚丙稀酰胺凝胶电泳对其纯度进行测定离子交换层析法(ion-exchange chromatogramphy简称IEC)中常用的阳离子交换剂有弱酸性的羧甲基纤维素(CM-纤维素)阴离子交换剂有弱碱性的二乙氨基乙基纤维素(DEAE-纤维素)蛋白
一实验目的和要求:了解离子交换层析的基本原理掌握蔗糖酶的提取纯化及离子交换层析的基本步骤熟悉有关生化技术的操作方法加样洗脱:将平衡好的DEAE—Sepharose FF上端的水小心吸干留下一薄层液面用长滴管将样品液5 ml沿管壁环形慢慢加进柱内待样品液全部进入DEAE—Sepharose FF内只剩下一薄层液面时用buff环形缓慢填满层析柱立即连上梯度洗脱杯(梯度洗脱杯中靠出口处的杯中装20mmo
实验九酵母蔗糖酶的提取及其性质的研究本实验为学生提供一个较全面的实践机会,学习如何提取纯化、分析鉴定一种酶,并对这种酶的性质,尤其是动力学性质作初步的研究。自1860年Bertholet从酒酵母Sacchyces Cerevisiae中发现了蔗糖酶以来,它已被广泛地进行了研究。蔗糖酶(invertase)(bD呋喃果糖苷果糖水解酶)(fructofuranoside fructohydr
酵母蔗糖酶的提取及性质测定引论及原理酶的分离制备在酶学以及生物大分子的结构功能研究中有重要意义本实验属综合性实验接近研究性实验包括八个连续的实验内容通过对蔗糖酶的提纯和性质测定了解酶的基本研究过程同时掌握各种生化技术的实验原理基本操作方法本实验技术多样化并且多个知识点互相联系实验内容逐步加深构成了一个综合性整体为学生提供一个较全面的实践机会学习如何提取纯化分析鉴定一种酶并对这种酶的性质尤其是动力学
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专业: : : 日期: 地点: 装 订 线实验报告课程名称:生物化学实验(甲) 指导老师: 成绩:__________________同组学生: 一实验目的和要求(必填)
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蔗糖酶的测定:酶液制备:称取左右棉花材料加入5ml0℃左右的磷酸—柠檬酸缓冲液[PH—]碾磨在冰浴中提取小时然后在4℃223离心20min收集上清液磷酸—柠檬酸缓冲液[PH—]母液:A )柠檬酸溶液(溶于1000ml)B)磷酸氢二钠溶液( )或 溶于1000ml)A):x ml B):y ml稀释到100ml PH— x= y=酶活性测定: 以蔗糖为底物反应总体积为[含1mlpH 的磷酸——柠
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级实验一 酶蛋白的定量测定及纯度检测§1.考马斯亮蓝法定量测定木瓜凝乳蛋白酶§2.SDS-凝胶电泳检测木瓜凝乳蛋白酶 纯度实验目的1掌握考马斯亮蓝法测定酶蛋白含量的原理 和方法2掌握SDS-凝胶电泳检测酶蛋白纯度的原 理和方法一实验原理 考马斯亮蓝法:根据蛋白质与染料特异性结合
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