Click s控制区 信息区基因表达载体 原核生物多为单细胞异养生长快代谢易于控制可通过发酵迅速获得大量基因表达产物 基因组结构简单便于基因操作和分析 多数原核生物细胞内含有质粒或噬菌体便于构建相应的表达载体 生理代谢途径及基因表达调控机制比较清楚 不具备真核生物的蛋白质加工系统表达产物无特定的空间构象 内源蛋白酶会降解表达的外源蛋白造成表达产物的不稳定复制子:是一段包含
24营养缺陷型选择标记:它与宿主的基因型有关911巴斯德毕赤酵母哺乳动物基因表达质粒载体是一类穿梭质粒能够在细菌(大肠杆菌)和哺乳动物细胞中进行扩增1719 哺乳动物基因表达宿主细胞选择的基本原则:来源丰富转化效率高表达效果好27COS细胞的特点:鼠骨髓瘤细胞如Sp20NSO和J558L等已被用作基因表达的受体细胞目前已有免疫球蛋白(Ig)tPA等多种外源基因在鼠骨髓瘤细胞中得到表达检测特异性蛋白
第四节 目的基因表达产物检测与分离纯化一、外源目的基因表达产物的检测 外源目的基因的表达包括转录和翻译两个阶段。外源基因表达产物的检测过程就是对特异性mRNA或蛋白质的检测。 特异性mRNA的检测: Northern杂交 特异性蛋白质的检测: ELISA, Western杂交 印迹杂交(Northern blot) 检测RNA(主要是mRNA)的方法 与Southern杂交的区别靶核酸:RNAR
真核生物H2H2蛋白On不同基因种有不同的σ因子都可识别特征序列一致的启动子 σ因子的更换对细菌的时序调控非常重要标准(一致)序列—因为-10-35区(众多)启动子同源性极强称之相应的σ称之为标准σ为σ70终止机理DNA模板RNA pol 和新转录RNA组成三元复合体I结构基因Z-β半乳糖苷酶基因( β-galactosidase)Y-半乳糖苷透酶(乳糖透酶)( β-galotoside pori
重组载体?大肠杆菌表达系统?芽孢杆菌表达系统?链霉菌表达系统S-D序列TTGACAPlac③应是可诱导型的乳糖启动子Plac的可控性:3核糖体结合位点( RBS) (ribosome binding site)是mRNA上与核糖体16sRNA结合的序列 ?全基因组测序共有4405个开放型阅读框架 ?基因克隆表达系统成熟完善 ?繁殖迅速培养简单操作方便遗传稳定 ?被FDA批准为安全的基因工程
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级三基因的表达(一)基因的概念及遗传信息1基因的概念基因是决定生物性状的基本单位基因是有遗传效应的DNA片段判断:所有生物的基因都是DNA片段请举例说明思考:你是怎样理解基因的概念的 我们在选修课本学的基因结构指的是什么2染色体DNA基因脱氧核苷酸和元素的关系元素(CHONP)脱氧核苷酸组成:基因每个基因中含有许多脱氧核苷
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级第4章基因的表达基 因 的 含 义 功能上:控制生物性状的遗传物质结构功能的基本单位 本质上(与DNA的关系):具有遗传效应的DNA片段 位置上(与染色体的关系):在染色体上呈直线排列遗传信息: 是基因上特定的脱氧核苷酸序列 注意:
#
违法有害信息,请在下方选择原因提交举报