自我总结的Westen Blot步骤简单实用蛋白质的提取(整个过程冰上进行)一.组织膜蛋白裂解液 bufferA1蛋白酶抑制剂蛋白保存液 40SDS60RIPA1蛋白酶抑制剂1.-80°C冰箱中取出组织放入研磨管中(研磨管和配套的研磨棒事先用去离子水冲洗用纸吸干水)按600-700μl100mg组织加裂解液研磨(研磨后研磨管和研磨棒用去离子水冲洗用纸吸干水)2.用1000枪转入离心管中4°C离心1
Western blot 详细操作步骤一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质(或酶)。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志,检测蛋白质的方法很多,除ELISA法外,也可用与检测DNA和RNA相类似的吸印方法。前两法有“南”和“北”之意,故本法遂被延伸称为Western(西)印迹法,该法能用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分辨出与专一抗血清结合的专一性蛋白质。将聚丙烯酰胺凝胶上分辨出的蛋白质转移到硝酸纤
Western 印迹法这种技术是把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相支持体,并以针对特定氨基酸序列的特异性试剂作为探针检测之。Western 使用的探针是抗体,它与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。这种技术的作用是对非放射性标记蛋白组成的复杂混合物中的某些特异蛋白进行鉴别和鉴定。仪器:高压锅、玻璃匀浆器、高速离心机、分光光度仪、20℃低温冰箱、垂直板电泳转移装置、恒温水浴摇
western blot操作步骤之2012版Posted on? HYPERLINK o 下午 4:03 2012 年 2 月 3 日?by? HYPERLINK o View all posts by Bob Bob鄙人按下文的步骤操作已经做出来了稳定可重复的背景干净的western条带了所以相信你也行为了节省时间鄙人总结了一下western blot Quick Guid
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Westernblot 实验步骤?1. 组织块称重?2. 利用液氮研钵粉碎组织块?3. 加入RIPA缓冲液(每克组织3 ml RIPA)PMSF(每克组织30μl10 mgml PMSF)利用Polytron进一步匀浆(15000转分1分钟)维持4℃?4. 加入PMSF(每克组织30μl10 mgml PMSF)冰上孵育30分钟?5. 移入 =7typeid=88 t _blank 离心管4
1先将PCB文件1:1打印到硫酸纸上(一种半透明的纸)注意要镜像打印别打印反了你也可以用菲林或者投影胶片用激光打印机打印精度会更好些注意菲林的一面可以用喷墨的打印用激光打印时两面都可以的硫酸纸价格便宜一般的文具店就有卖2裁剪覆铜板覆铜板也就是两面都覆有铜膜的线路板将覆铜板裁成电路板的大小不要过大以节约材料3预处理覆铜板用细砂纸把覆铜板表面的氧化层打磨掉以保证在转印电路板时热转印纸上的碳粉能牢固的印
Western Blot(免疫印迹法)实验方法步骤Western Blot(免疫印迹法)主要包括以下4个基本步骤:n?????样品制备n??? ?电泳分离n??? ?蛋白的膜转移n??? ?免疫杂交与显色――蛋白检测溶液和试剂n??? 1X 磷酸盐缓冲液(PBS)n??? Modified RIPA bufferTris-HCl: 50 mM, pH 74 ; NP-40: 1% ;Na-deo
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