现代医药卫生 2004
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人的外周血淋巴细胞培养 一实验目的: 三实验材料:四操作步骤:五结果分析:二实验原理:六参考文献:一实验目的:掌握人体微量血液体外培养制备染色体标本的方法 二实验原理: 外周血液中的小淋巴细胞几乎都处在G1期(或Go期)一般情况下是不再分裂的在培养液中加入植物凝血素 (PAH) 时这种小淋巴细胞受刺激转化成为淋巴母细胞随后进入有丝分裂这样经过短期培养秋水仙素的处理低渗和固定就可获得大量的
实验一外周血淋巴细胞的分离PBMC: peripherial blood mononuclear cell (T cell B cell and monocyte)原 理外周血各种血细胞的密度不尽相同利用淋巴细胞分层液(Ficoll)作密度梯度离心使一定比重的细胞群按相应密度梯度分布从而将各种血细胞加以分离 原 理外周血红细胞粒细胞单个核细胞血小板淋巴细胞单核细
遗传病的分析3培养细胞的染色体制备定 义在细胞的生长周期中中期染色体的长短大小恒定性正适合我们对其进行分析研究因此利用人工的方法使大部分分裂细胞处于中期而不向后期转化并获得之经处理制片后观察分析器 材细胞株普通光学显微镜冰载玻片酒精灯试 剂胰旦白酶液 KCL秋水仙素固定液(冰醋酸甲醇 1:3)Giemsa染液操 作1. 收集细胞前6h培养细胞中加5ugml秋水仙素2滴混匀后继续培养2. 胰旦白
人类染色体G显带标本的制备一原理常规制备的染色体标本经烤片后用热碱各种蛋白酶尿素去垢剂或其它溶液等预处理再以Giemsa 染色在油镜下可看到染色体两臂显示出着色深浅不同的横纹最常用的是胰蛋白酶法可能的机理是:G带区含有较丰富的A-T 对在间期核呈固缩状态而且是DNA晚复制区之一Giemsa染料在G带区是与DNA结合而且与结合DNA的染色质非组蛋白有关Giemsa染料是噻嗪--曙红染料染色体的着色有
人类外周血染色体制备一、原理人外周血小淋巴细胞,通常都处在G1期(或G0期),一般情况下不进行分裂。如在培养液中加入植物血凝素(PHA),这种小淋巴细胞受到刺激可转化为淋巴母细胞,进入有丝分裂。短期培养后,经秋水仙素处理,低渗和固定,即可得到大量的有丝分裂细胞。人体的1ml外周血内一般含有约1×106~3×106个小淋巴细胞,足够染色体标本制备和分析之用。二、用品和试剂1.5ml注射
综合性实验外周血培养及染色体分析涉及的技术有:无菌操作技术细胞培养技术细胞分离技术显微摄影技术等 一实验目的和要求1 掌握无菌操作的原理和方法2 掌握外周血培养的原理和方法3 掌握外周血淋巴细胞染色体制备的技术4 综合运用已掌握的知识基础和已具备的 实验能力提高科学研究的综合素质 二实验原理 细胞培养是一种程序复杂而又要求十分严谨的实验技术要使细胞在体外长期生存必须模拟体内环
万方数
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