24营养缺陷型选择标记:它与宿主的基因型有关911巴斯德毕赤酵母哺乳动物基因表达质粒载体是一类穿梭质粒能够在细菌(大肠杆菌)和哺乳动物细胞中进行扩增1719 哺乳动物基因表达宿主细胞选择的基本原则:来源丰富转化效率高表达效果好27COS细胞的特点:鼠骨髓瘤细胞如Sp20NSO和J558L等已被用作基因表达的受体细胞目前已有免疫球蛋白(Ig)tPA等多种外源基因在鼠骨髓瘤细胞中得到表达检测特异性蛋白
Click s控制区 信息区基因表达载体 原核生物多为单细胞异养生长快代谢易于控制可通过发酵迅速获得大量基因表达产物 基因组结构简单便于基因操作和分析 多数原核生物细胞内含有质粒或噬菌体便于构建相应的表达载体 生理代谢途径及基因表达调控机制比较清楚 不具备真核生物的蛋白质加工系统表达产物无特定的空间构象 内源蛋白酶会降解表达的外源蛋白造成表达产物的不稳定复制子:是一段包含
第四节 目的基因表达产物检测与分离纯化一、外源目的基因表达产物的检测 外源目的基因的表达包括转录和翻译两个阶段。外源基因表达产物的检测过程就是对特异性mRNA或蛋白质的检测。 特异性mRNA的检测: Northern杂交 特异性蛋白质的检测: ELISA, Western杂交 印迹杂交(Northern blot) 检测RNA(主要是mRNA)的方法 与Southern杂交的区别靶核酸:RNAR
真核生物H2H2蛋白On不同基因种有不同的σ因子都可识别特征序列一致的启动子 σ因子的更换对细菌的时序调控非常重要标准(一致)序列—因为-10-35区(众多)启动子同源性极强称之相应的σ称之为标准σ为σ70终止机理DNA模板RNA pol 和新转录RNA组成三元复合体I结构基因Z-β半乳糖苷酶基因( β-galactosidase)Y-半乳糖苷透酶(乳糖透酶)( β-galotoside pori
原生质体培养技术植物
普通生物学CAI课件上 一 页下 一 页生命科学与理学院普通生物学课程组第六章 基因及其表达与调控一基因的本质 二DNA分子的结构 三DNA的复制 四RNA的结构与功能 五遗传信息的表达 六基因表达的调控 七基因突变与修复 八基因与人类疾病 普通生物学CAI课件上 一 页下 一 页生命科学与理学院普通生物学课程组本章目录总目录一基因的本质 普通生物学CAI课件上 一 页下 一 页生命科学与理学院
第十六章 基因表达调控 Regulation of Gene ExpressionInstitute of Genetic EngineeringInstitute of Genetic Engineering真核基因表达调节Regulation of Eukaryotic Gene Expression第 四 节基 本 内 容真核基因组结构特点真核基因表达调控基本特点RNA polⅠ和pol
第十章(3)RNA的种类及功能:(1)该过程起始于 终止于 (2)该过程进行的碱基配对是 (3)核糖体在mRNA上如何移动
重组载体?大肠杆菌表达系统?芽孢杆菌表达系统?链霉菌表达系统S-D序列TTGACAPlac③应是可诱导型的乳糖启动子Plac的可控性:3核糖体结合位点( RBS) (ribosome binding site)是mRNA上与核糖体16sRNA结合的序列 ?全基因组测序共有4405个开放型阅读框架 ?基因克隆表达系统成熟完善 ?繁殖迅速培养简单操作方便遗传稳定 ?被FDA批准为安全的基因工程
(对应学生用书P117)知识梳理一、遗传信息的转录1.RNA的结构和种类(1)结构:与DNA相比,RNA在组成上的差异表现在:五碳糖是核糖,碱基组成中没有T,而替换为U(尿嘧啶)。(2)种类:mRNA、tRNA和rRNA三种。二、遗传信息的翻译1.翻译(1)概念:游离在细胞质中的各种氨基酸,以mRNA为模板合成具有一定氨基酸顺序的蛋白质的过程。(2)场所:细胞质中的核糖体。(3)运载工具:tRNA
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