#
YPD: Difco peptone20 g/LYeast extract 10 g/L葡萄糖 20 g/LYPD固体: Difco peptone20 g/LYeast extract 10 g/L葡萄糖 20 g/LDifco Agar (for plates only) 20 g/L调pH至65,灭菌条件为高压1210C灭15 min(以下所涉及的需要加入碳源的培养基类型均与此相同)。Y
Conservation of replication timing reveals global and local regulation of replication origin activityHYPERLINK =Mx000fcller CA[auth]Carolin A. Müllerand HYPERLINK =Nieduszynski CA[auth]Conrad
酵母感受态细胞的制备及酵母转化酵母感受态细胞的制备转化规模YPDA 培养基平板上活化酵母菌小大文库接直径2-3ml的单克隆1个或多个于1ml YPDA 或SDa培养基中(最好选用四周之内的酵母菌落)涡旋打散菌体转移到表中右面所示体积的YPDA或SD培养基中50ml 50ml150ml30℃250rpm振荡培养16-18h至OD600大于1.5转移过夜培养的培养物于表中右面所示体积的YPDA中
目录介绍4试剂盒物品清单 7额外附加物品列表9酵母菌株11酵母载体14方法简述:单杂交文库的构建和筛选16方法简述:双杂交文库的构建和筛选17构建用于酵母单杂交的报告质粒载体18构建用于酵母双杂交的DNA-BD融合载体19构建生成cDNA文库21构建和筛选酵母单杂交和双杂交文库(简述)27酵母单杂交文库的构建和筛选28酵母双杂交文库的构建和筛选30方法A:通过酵母配对(Yeast Mat
#
蛋白相互作用与酵母双杂交Protein-protein Interaction&Yeast Two-hybrid黄宝玉 2012817Slide 1报告内容:蛋白相互作用与研究方法酵母双杂交原理和方法酵母双杂交的发展已有实验的进展存在问题与下一步计划Slide 2Protein-protein Interaction蛋白质之间相互作用以及通过相互作用而形成的蛋白复合物是细胞各种基本功能的主要完成者
#
酵母双杂交-80保存的AH109菌种分别于YPD固体培养基上划线,2-3d;挑取比较健康的单克隆,接入50ml YPD液体培养基中,30℃,200rpm, 过夜培养至OD60015(16~18h);取适量过夜菌液接种于100ml新鲜的YPD液体培养基中,至OD600=01-02,30℃,200rpm培养至OD600=04-06(约3~5hr);室温离心3500rpm,5min,弃上清;加入25
LexA酵母双杂交系统简介一、LexA酵母双杂交系统的设计原理报告质粒p8op-LacZ的GAL4 UAS编码序列被完全去除,因此在缺乏LexA融合激活剂的情况下,报告基因LacZ的转录活性为零,该基因的筛选标志为URA3,可以作为有自主复制能力的质粒存在于酵母EGY48菌株中,也可以被整合到EGY48基因组DNA上。质粒pLexA的筛选标志为HIS3,在双杂交系统中用于表达DNA-B
违法有害信息,请在下方选择原因提交举报