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  石蜡切片免疫组化步骤石蜡切片放置在60℃恒温箱中烘烤120分钟脱蜡和水化：二甲苯(20min)→二甲苯(20min)→无水乙醇(5min×2次)→95乙醇(5min×2)→90(5min)→80乙醇(5min)PBS洗2次各5min蒸馏水冲洗1次5min抗原修复：压力锅开始喷气时盖上气阀约冷却取下气阀冷却至室温蒸馏水洗1次5minPBS洗2次各5min加3H2O2孵育30min(室温)PBS洗3次

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  石蜡切片法的一般流程为:取材→固定→抽气→ =SE6B497E6B6A4ch== t _blank 洗涤→脱水→透明→浸蜡→包埋→修块→切片→粘片→染色→封片.(一)取材 用锋利的 =SE58880E78987ch== t _blank 刀片切取新鲜的植物材料选定适宜的材料立即固定. 取材的注意事项如下: (1)取材料要新鲜.动作要迅速以免挤压损坏组织取病理材料时应设

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  叶片解剖结构观察（石蜡切片法） 1取材成熟的叶片通常茶树新梢发育到一芽三四叶时鱼叶上第一或第二张叶才成熟茶树新梢发育较为整齐取样标准为待春梢一芽四至六叶完全展开时取鱼叶上发育正常的第二叶一般选三个不同新梢每个新梢上取一片则为三个重复[1]2步骤[2]：石蜡切片的过程：固定→洗涤→脱水与硬化→脱酒精→包埋→切片→粘片→脱蜡→染色→脱水→透明→封胶2．1 FAA固定：每张叶片沿中脉切成长79mm宽5

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  四注意事项 透明的注意事项 使用透明剂时要随时盖紧盖子以免空气中水分进入 更换透明剂动作要迅速 材料周围出现白色雾状应退回纯酒精中重新脱水 透蜡的注意事项 动物材料常用的石蜡熔点为52-56oC植物材料为54-60oC 透蜡温度要恒定不可忽高忽低 包埋的注意事项 包埋前应先把必需的用具（恒温箱温台纸盒）准备好 包埋用的镊子要先放在温箱中预热

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  第一天一、脱水7:00-9:00 从FAA中取出材料在50ml烧杯（70%酒精）中洗涤并按大小分级；转至离心管4ml 脱水2h9:00 -11:00 85%11:00-13:0095%13:00-14:30100%14:30-16:00 100%二、透明16:00-18:00 1:1=酒精：二甲苯 18:00-19:30 二甲苯19:30-21:00二甲苯 准备融蜡 体积=离心管数*2三、浸蜡

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  1 组织固定、包埋和切片11 固定1）组织收集（组织越小越好，5mm），浸于新鲜配置的FAA固定液，FAA固定液配方如下：95%乙醇50ml37%甲醛10ml冰醋酸 5mlddH2O35ml2）抽真空，直到气泡出现在表面，保持真空10分钟，缓慢释放真空，组织沉入管底部。3）抽完真空后根据需要补充注满FAA固定液，置于4度冰箱过夜。12 脱水： 以下步骤在室温进行（乙醇为水中含量）：50%乙醇，