方法一:首先需要把细胞养在玻璃片上(悬浮细胞需要用多聚赖氨酸包被过的玻璃片)然后在4PFA里面室温下固定30分钟PBS洗两次0.1 TX-100室温下作用1-2分钟使细胞膜通透接下来进行荧光标记需要在一个大的容器(面积大扁平状的比如大的培养皿)里面放一张用水打湿的滤纸以保持湿度剪一片合适大小的parafilm在上面滴上稀释在1BSATBS中的一抗(稀释倍数依具体抗体而定)每个玻璃片30ul足