单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级SDS-PAGE凝胶电泳SDS-PAGE凝胶电泳实验原理实验步骤注意事项SDS-PAGE的优点SDS-PAGE的缺点实验常见问题及处理小技巧实验步骤1.试剂配制 (1) 30丙烯酰胺(Acr):称Acr30g甲叉双丙烯酰胺(Bis)0.8g加蒸馏水至100ml过滤后置棕色瓶中 4℃12月(2)10SDS(十二烷基磺酸钠)
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级蛋白质双向电泳及质谱技术大连理工大学refine蛋白质双向电泳技术双向电泳简介2-DE是目前唯一种可以仅通过一次操作解析上千种蛋白质的技术 第一向—等点聚焦(IEF)pH梯度载体pI第二向—十二烷基硫酸钠-PAGE(SDS-PAGE)SDS作为变性剂和助溶剂分子量样品等点聚焦(第一向)双向电泳的基本原理与流程示意分子量pH 梯
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级第八章 蛋白质和氨基酸的测定 (p114)第一节 概述 蛋白质是含氮的有机化合物分子量很大主要由CHONS五种元素组成某些蛋白质中还含有微量的 PCuFeI 等 蛋白质是生命的物质基础人体1113总热量来自蛋白质无论动物植物都含有蛋白质只是含量及类型不同动物蛋白和豆类蛋白是优
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级Western印迹实验目的实验原理 Western印迹杂交法是利用特异性抗体做探针对附着于固相支持体上的某些特异性蛋白进行鉴别和定量的方法它具有固相操作简便及不必对细胞进行放射性预标记
蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白质的western blot蛋白质免疫印迹分析又称Western Blotting是以某种抗体作为探针使之与附着在固相支持物上的靶蛋白所呈现的抗原部位发生特异性反应从而对复杂混合物中的某些特定蛋白质进行鉴别和定量这一技术将蛋白质凝胶电泳分辨率高与固相免疫测定特异性强的特点结合起来是一种重要的蛋白质分析测试手段实验目的了解蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白质的we
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级9. 蛋白质和氨基酸的测定9.1 概述9.2 凯氏定氮法9.3 蛋白质的快速测定法9.4 氨基酸总量的测定9.5 氨基酸的分离与测定9.1 概 述(1)蛋白质的生理功用及在食品中的作用(2)食品中的蛋白质含量(3)蛋白质系数(4)蛋白质水解(5)蛋白质测定方法9.1 概述 ① 蛋白质是生命的物质基础是构成生
1.当你在首次对未知样品进实验时建议你使用以下的样品溶液:将蛋白溶解在:·8M尿素4CHAPS 60 mM DTT 2 Pharmalyte 3-10 溴酚蓝 溶解大蛋白或疏水蛋白量更难溶的蛋白可以使用以下方法: ·7M尿素2M硫脲4CHAPS 60M DTT 2 Pharmalyte pH 3-10 溴酚蓝2. 为了从蛋白含量很低并且含有大量干扰物质的组织(如植物组织)中制备样品你可以
??? ?? ??? ????? ??? ???? ??????? ???? ???? ????? ??第十章 蛋白质和氨基酸的测定第一节 概述1蛋白质是生命的物质基础:是构成细胞的组成成分:细胞膜中的蛋白质线粒体内质网等细胞器上的结构蛋白或酶染色体中的核蛋白血液中的血红蛋白也是激素和抗体的基本成分2担当重要的生理功能:是生物体发育及修补组织时所需氨基酸的来源物质代谢的生物催化剂营养物质及气体的运
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级蛋白质核磁脉冲序列分析阮科kruanustc.edu生物大分子波谱学原理吴季辉脉冲序列基本原则1平衡态密度算符:SgIIZ如15N标记蛋白gHHZgNNZ2Delay时期Hamilton算符为wIIZ wSSZ pJIzSz(两核体系)多核体系包括所有的化学位移算符和可能的J耦合算符3短的硬脉冲一般只考虑脉冲所起的作
Western Blot原理显色分类及操作步骤 一 原理 与Southern或Northern杂交方法类似但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳被检测物是蛋白质探针是抗体显色用标记的二抗经过PAGE分离的蛋白质样品转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上固相载体以非共价键形式吸附蛋白质且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原与对应的抗体
Click to edit Master text stylesSecond levelThird levelFourth levelFifth level生命科学与技术学院蛋白质及氨基酸的测定§6.4 蛋白质及氨基酸的测定一 概述二 蛋白质的测定方法三 氨基酸的测定方法 蛋白质是含氮的有机化合物分子量很大主要由CHONS五种元素组成某些蛋白质中还含有微量的 PCuFeI 等 蛋白质
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级实验八 SDS-聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白质一目的要求1.学习电泳原理和技术2.学习和掌握SDS-聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白质技术二原理聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(acrylamide简称Acr)和交联剂NN-甲叉双丙烯酰胺(NN—methylene-bisacylamide简称Bis)在加速剂NNN?N?—
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级Clustalx 的实例操作 蛋白质序列分析二班 陈雯 2010602128Why to use it 在寻找基因和致力于发现新蛋白的努力中人们习惯于把
L利用BIAcore通过表面胞质基因共振光谱学分析相互作用的蛋白质RAMc通过伯氨基与CM-5传感芯片表面的结合1.将CM-5传感芯片模块嵌入BIAcore仪器2.全部采用过滤并除气的HEPES缓冲盐溶液3.将分别含有NHSEDC乙醇胺和RAM Fc以及20 mmolL HCl各100μl的小管置于BIAcore自动进样器架的适当位置4.将一个空管置于BIAcore自动进样器架上5.开动仪器
生物化学与分子生物学实验实 验 一蛋白质的两性反应与等电点测定试管中液体的混匀法 旋转法 指弹法 甩动法 倒转法与玻棒搅拌法 刻度吸量管 规格:分到尖端者和不到尖端者两种所标刻度有自上而下或自下而上的两种0.1-10ml刻度到尖端者(<2ml) 要吹出管尖液体 特点 用途:量取10ml以下的任意体积液体之用吸量管的使用方法拿法取液调刻度放液吸量管的选用原则 选用与取液量最近并大于最大取液量的吸
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级常用蛋白质相互作用技术介绍SPR技术分析蛋白质相互作用体外转录和翻译鉴定蛋白质相互作用 coupled transcriptiontranslation reaction 偶联的转录和翻译过程 continuous exchange cell-free (CECF) principle 持续交换和非细胞体系的原理 偶联的转录和
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级第八章 食品中蛋白质和氨基酸的测定 一 测定意义蛋白质是含氮的有机化合物分子量很大主要由CHONS五种元素组成某些蛋白质中还含有微量的 PCuFeI 等 在食品和生物材料中常包括蛋白质可能还包括有非蛋白质含氮的化合物(如核酸含氮碳水化合物生物碱等含氮类脂卟啉和含氮的色素)蛋白质是生命的物质基础人体1113总热量来自蛋白质
Western Blotting Review摘要:本文主要是针对Western bloting的原理及操作进行了简单的阐述Western印迹法是利用抗原 HYPERLINK :show.bioonantibody t _blank 抗体的免疫反应先将蛋白通过SDS-PAGE电泳分离开来然后再利用电场力的作用将胶上的蛋白转移到固相载体(NC膜)上然后再加 HYPERL