相关文档

• 拟南芥原生质体转化系统.doc

  拟南芥原生质体遗传转化目的了解在拟南芥悬浮培养的细胞中瞬间表达目的基因的遗传转化方法。学习和掌握拟南芥原生质体的制备方法。原理原生质体是除去细胞壁的裸露细胞。由于消除了细胞壁的障碍，故原生质体是遗传操作、基因转化的好材料。以植物原生质体为材料进行遗传转化，可以瞬间表达外源基因，也可以获得外源基因稳定表达的转基因细胞系或转基因植株。常用的进行原生质体遗传转化的方法有电击法和PEG介导的转化法。电

• 拟南芥原生质体的提取和转化.docx

  拟南芥原生质体的提取和转化取4周后抽薹前的叶片，切成1mm宽的长条，置于甘露醇溶液（称182g D-甘露醇于20ml双蒸水中）；共需叶片约90片； 将步骤1中细条捞出，置于酶解液中；避光，23℃,40-50rpm摇床上酶解3小时； 酶解液过100-200目的筛子，收集滤液，置于15ml离心管中，均分为两管；于4℃，60g，离心15min；原生质体用冰冷W5溶液轻柔洗涤，每管4ml；4℃，100

• 拟南芥原生质体.docx

  Arabidopsis Protoplast isolation1 Prepare enzyme solution (see Note 1) 2 Heat the enzyme solution at 55?C for 10 minutes to inactivate proteases and enhance enzyme solubility3 Cool the solution to r

• 拟南芥原生质体制备.docx

  拟南芥原生质体的制备 (Liu et al, 2013)拟南芥原生质体分离前要求：a保持拟南芥生长条件稳定；b大约3-4周大的抽叶前苗子用于分离原生质体；c选择健康未受到胁迫的苗子；d一般用15mL酶解液酶解20片叶子每次可以做大约15个转化。①试剂配制： 母液试剂：182g Mannitol（18217g/moL）溶于ddH2O，定容至100mL得到1M Mannitol。149g KCl（

• 拟南芥原生质体亚细胞定位Copy_of_Localization_of_procedure.docx

  亚细胞定位Fresh Arabidopsis leaves Fast temp to 4oC for the centrifugation rotorThaw the enzyme solution in ice and put the w5 solution in the 4oc freezer准备冰块于冰盒准备各种试剂 （黄色部分），需要准备的仪器等（红色部分）; Freshly PEG

• 农杆菌转化拟南芥.pdf

  #

• 拟南芥原生质体分离与转化-作物逆境分子生物学实验室优化版.docx

  \* MERGEFORMAT 1 原生质体分离与转化实验药品用途药品名称货号规格单价备注质粒提取葡萄糖Tris-HClEDTANaOHSDS乙酸钾冰乙酸溶菌酶乙醇异丙醇NaClCsCl

• 转基因拟南芥.doc

  拟南芥培养（1）拟南芥种子消毒：向装有拟南芥种子的离心管加入1 ml 75%酒精，上下摇晃消毒2 min，再加入1 ml 01%升汞，消毒5 min，用灭菌水清洗4 ~ 5次，每次2 min，最后一次将种子均匀吹于MS固体培养基上，吸掉培养基表面多余水分；（2）将处理好种子的MS培养基放于4℃条件下春化3天后，至于组织培养室中培养。条件为：22℃，16 h光照，8 h黑暗；（3）到拟南芥有四片

• 花序浸染法转化拟南芥.doc

  花序浸染法转化拟南芥1 种植或者移栽拟南芥之前都需要提前一天泡土泡土过程中要加足量的水营养土和蛭石1：1比例混合2 可以采取两种方法种植野生型拟南芥：一种是直接在大钵子里种八九颗小钵子里种四五颗等它稍微长大以后去掉长势不好的或者不能成活的大钵子保留四颗小钵子保留两颗这种方法不用移栽另一种是现在大钵子里种上几十颗(小钵子里相应的减少)等它们长成小苗后移栽(千万不要等它们长大了再移栽因为这时它们的根会

• 花序浸染法转化拟南芥.doc

  3 花序浸染法转化拟南芥1 种植或者移栽拟南芥之前都需要提前一天泡土，泡土过程中要加足量的水。营养土和蛭石1：1比例混合。2 可以采取两种方法种植野生型拟南芥：一种是直接在大钵子里种八、九颗，小钵子里种四、五颗，等它稍微长大以后去掉长势不好的或者不能成活的，大钵子保留四颗，小钵子保留两颗，这种方法不用移栽；另一种是现在大钵子里种上几十颗（小钵子里相应的减少），等它们长成小苗后移栽（千万不要等它