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  2. 第二向的加样操作与相应的单向电泳不同经过第一向IEF-PAGE蛋白质在第一向的凝胶柱内得到了初步的分离在进行第二向SDS-PAG时其加样方式是将第一向电泳后的凝胶柱包埋在第二向的凝胶板内通常包埋于凝胶板的上端由于第二向的电泳分离系统不同于第一向因此必须将第一向电泳后的凝胶柱在包埋于第二向凝胶板之前预先在第二向的电泳分离系统内进行震荡平衡所用的平衡液通常与单向SDS-PAG所用的蛋白质样品处理

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  双向凝胶电泳（2-DE）双向凝胶电泳的原理是第一向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离第二向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离把复杂蛋白混合物中的蛋白质在二维平面上分开近年来经过多方面改进已成为研究蛋白质组的最有使用价值的核心方法分离蛋白质组所有蛋白的两个关键参数是其分辨率和可重复性在目前情况下双向凝胶电泳的一块胶板（16cm×20cm）可分出34千个甚至1万个可检测的蛋白斑点这与10万个基因

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  1.当你在首次对未知样品进实验时建议你使用以下的样品溶液：将蛋白溶解在：·8M尿素4CHAPS 60 mM DTT 2 Pharmalyte 3-10 溴酚蓝 溶解大蛋白或疏水蛋白量更难溶的蛋白可以使用以下方法： ·7M尿素2M硫脲4CHAPS 60M DTT 2 Pharmalyte pH 3-10 溴酚蓝2. 为了从蛋白含量很低并且含有大量干扰物质的组织(如植物组织)中制备样品你可以

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  双向电泳操作步骤及相关试剂配制A． 实验过程一、实验原理：2-DE的第一向电泳等电聚焦是基于等电点不同而将蛋白粗步分离，第二向SDS-是基于蛋白质分子量不同，而将一向分离后的蛋白进一步分离。这样就可以得到蛋白质等电点和分子量的信息。二、实验步骤：1样品的溶解取纯化后的晶体蛋白30mg，加入300μl裂解液(1mg蛋白:100μl裂解液)振荡器上振荡10min左右，共处理一个小时。其中每隔10～

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  双向电泳的实验过程admin一? ? ? ? 实验原理：2-DE的第一向电泳等电聚焦是基于等电点不同而将蛋白粗步分离第二向SDS-PAGE是基于蛋白质分子量不同而将一向分离后的蛋白进一步分离这样就可以得到蛋白质等电点和分子量的信息二? ? ? ? 实验步骤：1. 样品的溶解取纯化后的晶体蛋白加入300ul裂解液(1mg蛋白:100ul裂解液)振荡器上振荡10min左右共处理一个小时其中每隔1015

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  ? Protein identificationcharacterization ? Protein-protein interaction ? Post-translational modifications ? Subcellular location ? Elucidation of pathway ? Target validation and toxicology ? Drug disc

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