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• 细胞培养基本实验操作.doc

  细胞培养基本实验操作一、细胞复苏1)提前准备完全培养基并预热至37℃（可以放至在水浴或培养箱中进行预热，需要多少预热多少，反复预热会导致培养基失活）；用清洗洁净的烧杯或其他合适容器装有适量超纯水，然后放入37-38℃水浴锅中预热至37℃（至少需30min）；把所需耗材和其他物品放置于超净工作台中紫外照射灭菌；2)提前查询所取冻存管的存放位置，把整个存储架子提起，为了降低复温对其它细胞的影响，可把

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  常用设备 准备室的设备： 单蒸馏水蒸馏器双蒸馏水蒸馏器酸缸烤箱高压锅储品柜(放置未消毒物品)储品规(放置消毒过的物品)包装台配液室的设备：扭力天平和电子天平(称量药品)PH计(测量培养用液PH值)磁力搅拌器(配置溶液室搅拌溶液)培养室的设备：液氮罐储品柜(存放杂物)日光灯和紫外灯空气净化器系统低温冰箱(-80℃)空调二氧化碳缸瓶边台(书写实验记录)必须放在无菌间的设备：离心机(收集细胞)超净

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  细胞培养动物细胞培养工作的基本要求培养前准备：做好实验计划和操作程序准备好所需器材和物品操作间消毒：紫外线照射30min实验结束后75酒精擦拭工作台洗手和着装：穿拖鞋无菌衣带帽子口罩洗手后带手套火焰消毒：首先点燃酒精灯一切操作均需在火焰近处并经过烧灼进行注意：⑴金属器械灼烧的时间不可太长以防退火⑵吸过培养基的吸管不能再用火焰灼烧⑶开启关闭长有细胞的培养瓶时灼烧时间要短⑷胶塞过火焰不可时间长5实验中

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  培养基的配制：实验步骤：在超净台内安装好滤器用去离子水溶解1640培养基并用磁力搅拌器搅拌2 h使之充分溶解在超净台内过滤分装到250 mL的玻璃瓶内用封口膜封好-20℃保存过滤结束时还要取少许培养基进行菌培验证培养基是否是无菌?胎牛血清的处理：没有灭活的血清中含有补体成分需要将血清在56℃条件下灭活30 min在水浴锅内进行灭活的过程中要不停地摇晃使受热均匀防止沉淀析出来注意：刚取出的冻存

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  简单介绍一下细胞培养技术本人这段时间主要做细胞工作和大家共勉吧细胞培养技术一细胞培养的条件和要求 二细胞分离 三.体外培养细胞龄的计算四.细胞鉴别试验 五细胞计数六细胞传代 七细胞的冻存和复苏 八细胞培养用水处理 九选择小牛血清的微量细胞培养检查法 十葡萄糖测定法 十一乳酸测定法十二细胞培养方式仪器专场展示： HYPERLINK :.instrumentzcel

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  复苏细胞用品：保温桶液氮桶15ml离心管移液器培养瓶酒精酒精灯废液缸细胞培养液准备37oC水浴桶培养液预热到37oC.（避免培养液重复预热每次取足量培养液操作即可）加9ml培养液到15ml的离心管中从液氮中迅速取出冻存管37oC温水中快速摇动至冰核消失（3分钟内勿把整个冻存管浸入水中）快速用70酒精擦拭放入洁净台冻存管口迅速过火开盖手持无菌吸管将细胞加入含有培养液的离心管中用1ml培养液冲洗冻存管

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