1掌握动物组织总DNA的提取方法及其原理2掌握琼脂糖凝胶电泳分离核酸的原理和方法3学习核酸染色的方法 要提取动物组织DNA一般选择细胞膜较脆弱容易破碎的动物脏器如胸腺肝脏脾脏胰脏等用氯仿一异成醇混合液振荡核蛋白溶液使蛋白质变性然后离心除去变性蛋白质此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间而DNA溶于上层水相用两倍体积 95乙醇溶液可将DNA钠盐沉淀出来用十二烷基硫酸钠(SDS)等去污剂使蛋白
动物肝脏中DNA的提取和鉴定一实验目的1.学习并掌握动物组织总DNA的提取方法及其原理2.掌握琼脂糖凝胶电泳分离核酸的原理和方法3.学习核酸染色的方法 二实验原理 为了研究DNA分子在生命代谢中的作用常常需要从不同的生物材料中提取DNA由于DNA分子在生物体内的分布及浓度不同要选择适当的材料提取DNA动植物中小牛胸腺动物肝脏脾脏鱼类精子植物种子的胚中都含有丰富的DNA微生物中谷氨酸菌体含710面
小鼠肝组织DNA的提取及其含量测定实验目的:1掌握从组织细胞中提取DNA的基本原理2掌握DNA提取和鉴定的方法实验原理:本实验所用的是DNA酚抽提法是对1976年Stafford及其同事提出的方案的改进可用于多种来源标本的高分子量DNA样品的制备包括单层培养细胞悬浮生长细胞新鲜组织以及血液标本等提取DNA的基本思路DNA 以核蛋白形式存在于细胞核中利用DNA与RNA蛋白质和脂质等在物理和化学性质方
蛋白质的生物合成表达调控DNA提取的几种方法:
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级复习巩固:(1)如何观察DNA和RNA在真核细胞中的分布情况(2)真核细胞DNA的主要存在场所(3)证明DNA是遗传物质的三个经典实验(4)DNA分子双螺旋结构模型的提出者是谁(5)DNA分子双螺旋结构模型的主要特点1DNA分子由两条链组成这两条链按反向平行的方式盘旋成双螺旋结构.2DNA分子中的磷酸和脱氧核糖交替连接.排列在
质粒DNA的提取和鉴定 实验二十四目的掌握碱裂解法提取质粒的方法 了解质粒酶切鉴定原理质粒DNA的提取方法方法:碱裂解法;煮沸裂解;羟基磷灰石柱层析法,质粒DNA释放法;酸酚法等。概括起来主要是用非离子型或离子型去污剂、有机溶剂或碱进行处理及用加热处理所有分离质粒DNA的方法都包括3个基本步骤:培养细菌使质粒扩增;收集和裂解细菌;分离质粒DNA(有时还要求纯化质粒DNA,根据实验所需)选择哪一种方
2.DNA对酶高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解蛋白质但是对DNA没有影响 大多数蛋白质不能忍受60—80oC的高温而DNA在80oC以上才会变性 洗涤剂能够瓦解细胞膜但对DNA没有影响 2.提取DNA加等体积的体积分数为95的冷却酒精玻璃棒搅拌析出DNADB冷却的95的酒精
DNA的粗提取与鉴定蛋白酶因为酶具有专一性蛋白酶只水解蛋白质而不会对DNA产生影响温度值为6080℃因为该温度值蛋白质变性沉淀而DNA不会变性补充:DNA的变性是指DNA分子在高温下解螺旋其温度在80℃以上如在PCR技术中DNA变性温度在95℃在处理植物组织时需要进行研磨其目的是什么研磨不充分产生什么结果具体做法10mL鸡血20mL蒸馏水→同方向搅拌→3层尼龙布过滤→滤液谢谢
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实 验 七 质粒DNA的提取和鉴定 目的 掌握碱裂解法提取质粒的方法 了解质粒酶切鉴定原理质粒DNA能从细菌中提出来又能再转入细菌这个过程称转化转入的质粒DNA仍能进行复制产生多个拷贝提纯的思路质粒的特性:共价闭合环状的小分子量DNA要去除的物质: 蛋白 基因组DNA 脂类及小分子杂质 RNA 质粒DNA的提取方法方法:碱裂解法煮沸裂解羟基磷灰石柱层析法质粒DNA释放法酸酚法等
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