单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级 生物化学实验2006.5 目 录实验一 糖类的定量测定实验二 纸层析法分析氨基酸实验三 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳实验四 酵母RNA的提取及含量测定实验五 凝胶层析法测定蛋白质分子量 实验六 蛋白质含量测定的二种方法实验七 园盘电泳分离血清蛋白实验一 糖类的定量测定—35-二硝基水杨酸比
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级实验室基本操作1玻璃仪器的清洗实验中所用的玻璃仪器清洁与否直接影响实验的结果往往由於仪器的不清洁或被污染而造成较大的实验误差有时甚至会导致实验的失败做生物化学实验对玻璃仪器清洁程度的要求比一般化学实验的要求更高这是因为:①生物化学实验中蛋白质酶核酸等往往都是以毫克和微克计的稍有杂质影响就很大②生物化学实验对许多常见的污染杂质十
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级生物化学实验 海南大学海洋学院水产学系实验室规则(一) 1自觉遵守学习纪律保持实验室肃静不得喧哗吵闹迟到早退更不得缺席 2爱护仪器厉行节约试剂药品蒸馏水等应节约使用不得浪费如不慎损坏仪器应及时报告老师说明原因经老师同意后方可换领并应按规定赔偿或处理贵重精密仪器应先熟悉使用方法在老师的指导下严格按操作规程操作
生物化学实验Biochemical Experiment实验内容安排3 实验记录与实验报告1层析技术原理分配层析吸附层析凝胶层析 4840示意图(交换树脂表面)电 泳 技 术e分辨率差1.原理 具有电泳和分子筛的双重作用2.聚丙烯酰胺凝胶的聚合单体:丙稀酰胺(Acr)交联剂:甲叉双丙稀酰胺交联剂(Bis) 催化剂 聚合形成的三维网状结构(1)盘状聚丙烯酰胺凝
纪 律考核方式注意试剂添加量:糖溶液塞氏试剂1-2ml混匀同时放入沸水浴注意观察各管颜色变化的时间及颜色的变化过程并做好记录 塞氏试剂: 溶解50mg间苯二酚(resorcinol)于100mL盐酸(盐酸:水=1:2vv)中 糖类分子中的还原性基团在碱性条件下将Cu2还原成Cu生成Cu2O沉淀沉淀颜色与沉淀颗粒大小有关沉淀颗粒大小与反应速度有关:速度慢颗粒大颜色偏红速度快颗粒小
实验八 SDS-电泳法测定 蛋白质分子量 实验目的学习并掌握SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法和测定蛋白质分子量的技术实验原理1、蛋白质混合样品中各蛋白质组分的分子大小和形状以及所带电荷多少等因素所造成的电泳迁移率有差别。在聚丙烯酰胺凝胶系统中,加入一定量十二烷基硫酸钠(SDS),形成蛋白质-SDS复合物,这种复合物由于结合了大量的SDS,使蛋白质丧失了原有的电荷状态,形成了仅保持原有分子大小为特征
实验五纸层析法鉴定转氨酶的转氨基作用 学习纸层析法的基本原理和操作技术了解转氨酶的转氨基作用实验目的:?????思考题:1、氨基酸体内代谢的途径? 脱氨基作用。主要方式:氧化脱氨基、转氨基、联合脱氨基及非氧化脱氨基。2、什么是转氨基作用?指在转氨酶的催化下,氨基酸的 α-氨基与α-酮酸的α酮基的互换反应。3、各种转氨酶中,那两种活性较高?4、谷丙转氨酶和谷草转氨酶在什么情况下发生异常变化 ? 它
实验六小牛肠碱性磷酸酶的提纯及比活力测定实验目的掌握小牛肠碱性磷酸酶的提取及酶活力测定的原理和方法酶活力: 在最适反应条件(25℃)下,每分钟内催化1?mol底物转化为产物所需的酶量为一个酶活力单位,即1U=1?mol/min。酶的比活力: 代表酶的纯度,用每mg蛋白质所含的酶活力单位数表示。比活力=活力(U)/蛋白(mg)=总活力(U)/总蛋白(mg)酶活力的测定方法: 分光光度法;荧光法;同
思考题:什么叫电泳?用醋酸纤维薄膜电泳做电泳支持物有什么优点?电泳图谱清晰的关键是什么?如何正确操作?生物科学与工程系生物化学教研室实验四 血清蛋白的醋酸纤维素薄膜电泳 生物科学与工程系生物化学教研室实验目的1掌握电泳法分离蛋白质的原理、操作方法。 2了解电泳法分离蛋白质的临床意义。 生物科学与工程系生物化学教研室分离蛋白质的方法电泳离子交换层析生物科学与工程系生物化学教研室实验原理电泳:带电质
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