下面内容综合了Agilent和网上查到的一些:一般来说反相HPLC的流动相包括有机相和水相有机相常用的为色谱甲醇和乙腈不太常用的还有四氢呋喃和异丙醇甲醇有其性价比的优势但是甲醇活性高可能与某些样品发生反应而且甲醇在低波长下有紫外吸收会降低分析方法的灵敏度乙腈虽然价格很高毒性比甲醇大但是洗脱能力比甲醇强很少与样品发生反应用作流动相系统压力要比甲醇低很多且截止波长比甲醇低20nm增加了检测出
高效液相色谱流动相选择流动相 1.流动相的性质要求 一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度与检测器兼容性好易于得到纯品和低毒性等特征流动相选择 1:由强到弱:一般先用90的乙腈(或甲醇)水(或缓冲溶液)进行试验这样可以很快地得到分离结果然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例2: 三倍规则:每减少10的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量保留因子约增加3倍此为三倍规则这是一个聪明而又省
反相高效液相色谱的缓冲体系PH的选择在反相高效液相色谱分析中选择正确的缓冲液PH值对可离解的化合物分析的重现性十分必要如果PH值不恰当可能导致不对称峰宽峰分裂峰或肩峰为能在定量分析中获得低的检测限两次分析之间较低的相对标准偏差(RSD)和保留时间的重现性尖锐的对成的峰很必要我们将讨论在使用缓冲液时如何选择缓冲液的PH值以及如何选择正确的缓冲体系什么时候需要缓冲溶液在反相色谱分析中流动相的PH
高效液相色谱柱的选择一硅胶基质填料 1正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其他具有极性官能团胺基团如(NH2APS)和氰基团CPS)的键合相填料由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他极性基团极性较强因此分离的次序是依据样品中各组分的极性大小即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低如正已烷(Hexane)氯仿(Chloroform)二
现代高效液相色谱中分离效果好坏的一个重要指标是色谱填料的选择但是色谱填料的选择范围很宽因此要做合适的选择必须对此有一定的认识和了解????一硅胶基质填料?????1正相色谱?正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其他具有极性官能团胺基团如(NH2APS)和氰基团CPS)的键合相填料????由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他极性基团极性较强因此分离的次序是依据样品中各组分的极性大
试药试液缓冲液流动相培养基等配制管理规程起草部门质量保证部被替代文件SP-SMP-08-发放编号:/分发部门质量保证部1目的:建立试药试液缓冲液流动相培养基等配制管理规程确保检验工作质量 2适用范围:试药试液缓冲液流动相培养基等配制管理 3有关责任:质量保证部制订管理规程QC人员实施GMP检查小组检查执行情况 4规程内容: 严格按照中国现行版药典或所检验产品执行的标
单击此处编辑母版样式单击此处编辑幻灯片母版样式第二层第三层第四层第五层色谱法的基本原理(ASF)色谱法是一种分离分析方法 分离原理: 混合物中各组分在两相间(固定相和流动相)进行分配当流动相中所含混合物经过固定相时就会与固定相发生作用由于各组分在性质和结构上的差异与固定相发生作用的大小强弱也有差异固此在同一推动力作用下不同组分在固定相中滞留时间有长有短从而按先后不同次序从固定相中流出
第20章高效液相色谱法 概述 高效液相色谱法:以经典液相色谱为基础,在气相色谱实验和技术基础上建立的一种液相色谱法一、HPLC与经典LC区别二、HPLC与GC差别三、高效液相色谱仪流程图四、特点一、HPLC与经典LC区别主要区别:固定相,输液设备和检测手段1.经典LC:仅做为一种分离手段 柱内径1~3cm,固定相粒径100μm 且不均匀 常压输送流动相柱效低(H↑,n↓) 分析周期长 无法在线检测
第20章高效液相色谱法 概述 高效液相色谱法:以经典液相色谱为基础,在气相色谱实验和技术基础上建立的一种液相色谱法一、HPLC与经典LC区别二、HPLC与GC差别三、高效液相色谱仪流程图四、特点一、HPLC与经典LC区别主要区别:固定相,输液设备和检测手段1.经典LC:仅做为一种分离手段 柱内径1~3cm,固定相粒径100μm 且不均匀 常压输送流动相柱效低(H↑,n↓) 分析周期长 无法在线检测
影响测定反相高效液
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