拟南芥材料快速PCR鉴定实验方法拟南芥基因组粗提缓冲液配置50mM Tris-HCl (PH 75)300mM NaCl300mM 蔗糖用镊子取一点点拟南芥叶片置于PCR小管,加入100μL的拟南芥基因组粗提缓冲液,用黄色枪头捣碎,缓冲液变绿即可,99℃孵育10min。加入缓冲液等体积的氯仿,震荡混匀,离心取2μL上清液作为模板进行PCR。注意事项T-DNA插入突变体和转基因株系的鉴定,图位克
拟南芥突变体的鉴定在TAIR中输入基因名称, 点search。?2、得到新界面之后往下拉,找到 \t _blank T-DNA Express,点击。在新界面右边一栏,找到Primers,点击。 3、在新界面下面一栏输上突变体的名称(名称的找寻在第一个界面上) 点击submit。得到T-DNA插入突变体鉴定引物设计
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Analysis of Arabidopsis cutin Note: Need 1-6g of Arabidopsis tissues (stems and/or leaves)~ 100 mg dry residue per g of leaves can be obtained (starting from about 3 g of leaves)IMPORTANT: ALWAYS RI
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拟南芥杂交1)选择母本:选择顶端刚刚能看见一点白色的花骨朵作为母本。2)去雄:用镊子小心去掉母本花的花萼(绿色部分),撑开花瓣,去掉雄蕊(呈微黄色)。首先,用镊子头部小心的沿着花苞的方向拨弄几下,把花苞拨松,去掉绿色的花萼;然后,用镊子把白色花瓣撑开,把微黄色的雄蕊夹掉。注意:镊子要进行消毒;不要碰到、损伤柱头。3)选择父本:选择花完全展开,呈十字状,雄蕊很黄的花作为父本。4)人工授粉:用镊子
拟南芥培养(1)拟南芥种子消毒:向装有拟南芥种子的离心管加入1 ml 75%酒精,上下摇晃消毒2 min,再加入1 ml 01%升汞,消毒5 min,用灭菌水清洗4 ~ 5次,每次2 min,最后一次将种子均匀吹于MS固体培养基上,吸掉培养基表面多余水分;(2)将处理好种子的MS培养基放于4℃条件下春化3天后,至于组织培养室中培养。条件为:22℃,16 h光照,8 h黑暗;(3)到拟南芥有四片
Arabidopsis Protoplast isolation1 Prepare enzyme solution (see Note 1) 2 Heat the enzyme solution at 55?C for 10 minutes to inactivate proteases and enhance enzyme solubility3 Cool the solution to r
拟南芥茎切片方法取1 ml FAA(Formalin-Acetic-Alcohol)固定液,加入15 ml离心管中,放置冰上;FAA固定液:配制100 ml dH2O35 ml95% 乙醇 50 ml甲醛(市售的含量为37%) 10 ml Acetic acid (乙酸) 5 ml4℃保存备用剪取拟南芥茎段08-1cm长即可,立即放入上述预冷的固定液中,在4℃冰箱固定过夜(*如果样品不下沉,需
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