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  PCR引物设计的11条黄金法则2006-7-21 8:15:42　信息来源：本站　 　　PCR引物设计的11条黄金法则 生物谷 PCR引物设计的11条黄金法则 1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计 DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的在NCBI上搜索不同物种的同一基因通过序列分析 HYPERLINK soft 软件(比如DNAman)比对(Alignment

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  SP6：ATT TAG GTG ACA CTA TAG T7：TAA TAC GAC TCA CTA TAG GG 例如LPGAATTCATTTAGGTGACACTATAGATCCGCGTGAGAAGAGAGAA例如 RP GAATTCTAATACGACTCACTATAGGGTTCTTGCTGGTTTGCATGAG

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  标准的PCR反应体系： 　　　　　　 10×扩增缓冲液 　 10ul　　　　　　 4种dNTP混合物 　 各200umolL　　　　　　 引物 　　　　 　 各10100pmol　　　　　　　 模板DNA 　　　 　　　 　　　　　Taq DNA聚合酶 　 　　　　　　　 Mg2　　　　　　 　　　　　　 加双或三蒸水至 　100ul　　PCR反应五要素： 参加PCR反应的物质主要有五种即引物酶d