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第17章高效液相色谱171 概述172 HPLC仪器 包括: 高压输液装置; 进样系统; 分离系统; 检测系统;辅助系统173 流动相和固定相简介174 高效液相色谱方法各论分配色谱、吸附色谱、离子交换色谱、尺寸排阻色谱和亲和色谱171 概述 高效液相色谱(HPLC)是以溶剂液体为流动相的色谱方法。按照固定相不同可分为:液液分配色谱;吸附色谱(液固色谱);离子交换色谱;尺寸排阻色谱(凝胶渗透色谱)
高效液相色谱法 附录Ⅵ D. 高效液相色谱法 高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱经进样阀注入供试品由流动相带入柱内在柱内各成分被分离后依次进入检测器色谱信号由记录仪或积分仪记录 1.对仪器的一般要求
(通常用的最多的是第二种即分配平衡)色谱分离原理 高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法液液分配色谱法(正相与反相)离子交换色谱法离子对色谱法及分子排阻色谱法 1.液固色谱法 使用固体吸附剂被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离分离过程是一个吸附-解吸附的平衡过程常用的吸附剂为硅胶或氧化铝粒度510μm适用于分离分子量2001000的组分大多数用于非离子型化合
检测器低可以敏感A2S1 S2 由于2-甲基丁基-14-二醇不仅缺乏必要的吸收基团而且不能在OB柱拆分应采用苯甲酰氯将其衍生为2-甲基丁基-14-二醇二苯甲酸酯后才能进行分离测定 蒸发光散射质量检测器(Evaporative Light-Scatting Mass Detector ELSD)蒸发流动相S 在硅胶吸附色谱中 对相对保留值和分离选择性起主导作用的是溶质与固定相的作用 流动
高效液相色谱法的主要类型与原理(一)正相键合相色谱法 固定相的极性大于流动相的极性 固定相-氨丙基氰丙基 流动相-以正己烷为底剂加入极性调节剂2.流动相的极性与保留因子的关系 极性强的组分的保留因子k 小先洗脱出柱流动相的极性增强洗脱能力减弱使组分 k 增大tR 增大反之k 减小 tR 减小1.分离机制 以RPIC分离碱类物质为例用离子对模式说明
吸附色谱库仑力蛋白酶抗体分离生物和医药分析2进样系统通常采用六通伐进样:3色谱柱(1)紫外-可见检测器荧光检测器结构示意图键合固定相非极性键合固定相: 键合在载体表面的功能分子是烷基苯基等非极性有机分子如最常用的ODS(Octa Decyltrichloro Silane)柱或C18柱就是最典型的代表其极性很小极性键合固定相: 键合在载体表面的功能分子是具有二醇基醚基氰基氨基等极性基团的有机分子
第十八章 高效液相色谱法High performance liquid chromatography;HPLC固定相刚性固体或硬胶流动相液体(有机溶剂或水等)分离机制液液分配色谱、液固吸附色谱、离子交换色谱、尺寸排阻色谱与亲和色谱高效液相色谱法高效液相色谱法与经典液相色谱法高压输液泵输送流动相,流速快,分析速度快颗粒极细(一般为10?m以下)、规则均匀的固定相,传质阻抗小,柱效高,分离效率
高效液相色谱简介仪器型号:Agilent 1200 HPLC高效液相色谱仪器厂商:美国安捷伦仪器性能: 流速范围:?步进压力范围: 0-40MPa(0-400bar0-5880psi)梯度组成精密度:<SD(1mLmin)可测项目:可用于痕量分析其检测限为ppbppm级样品要求:样品一般需预处理每个新来的同学请先在D盘建立自己的文件夹文件夹里再包括方法数据和序列三个子文件夹并在view-
高效液相色谱仪在药物含量测定中的应用摘要 本文简单介绍高效液相色谱在医药领域中的应用首先介绍高效液相色谱——蒸发光散射检测法在重要研究中的应用目前蒸发光散射检测已广泛应用于医药食品化工等行业本文主要简介ELSD的组成原理和特点以及影响检测性能的主要因素并对蒸发光散射检测法在中药研究中的应用进行综述而后文章简要介绍中药高效液相色谱指纹图谱的应用最后简要介绍高效液相色谱在常见药物含量检测中的应用关键字
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