TPS法提取植物DNA取少量叶片置2ml管子中,加入钢珠;粉碎机粉碎加入400-500ul TPS,75℃水浴30mins;;12000rpm离心10mins;取上清加等体积异丙醇,放置-20℃ 5h以上;12000rpm离心5mins,去上清;加入200ul 75%酒精,静置10mins,离心2mins,去酒精,干燥;加50ul ddH2O,混合均匀,离心。TPS配方100ml1M(PH80
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CTAB法提取植物基因组DNA 这种方法是由Murray 和Thompson(1980)修改而成的简便方法CTAB(十六烷基三乙基溴化铵)是一种去污剂可溶解细胞膜它能与核酸形成复合物在高盐溶液中(( molL NaCl)是可溶的当降低溶液盐浓度到一定程度( molL NaCl)时从溶液中沉淀通过离心就可将CTAB-核酸的复合物与蛋白多糖类物质分开最后通过乙醇或异丙醇沉淀DNA而CTAB溶于乙醇或异
简易CTAB法提取植物基因组DNA传统的CTAB法提取基因耗时较长,一般前后得2-3d左右,而用简化的方法1-2h即可完成,用于PCR或者酶切等都没有问题。CTAB提取液配方:CTAB提取液(PH=80)CATB20g/LNaCl(5844)14mol/L(81816g)EDTA(29225)10mmol/L(29225g)Tris-Base(12114)100mm
实验一 CTAB法提取植物基因组DNA实验目的:学习从植物组织中(幼叶)提取基因组DNA的基本原理和方法实验原理:采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)其对DNA的抽提产生不利的影响所以在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)以降低这些酶类的活性在液氮中研磨材料易于破碎并减少研磨过程中各种酶类的作用CTAB(hexadecyltrimet
Dellaporta法小量快速提取植物全基因组DNA前言该方法为QIAGEN 的DNA提取试剂盒所采用,所以获得的DNA产量较低但质量相对于CTAB及Quick法高。推荐不喜欢CTAB法耗时耗力或无法保证Quick法结果的同学使用。该方法所得DNA可直接用于T-DNA的Genotyping及点突变的CAPS或dCAPS,若要用于ALM-PCR克隆未知基因,建议做步骤7(由于实验室现已使用Tia
Trizol法提取RNA注意:全程戴口罩,手套(PE手套,胶皮手套),离心注意放置方向。所用所有物品全部为灭RNA酶的。器材:试剂:Trizolβ巯基乙醇氯仿 75%乙醇DEPC水 TAE Buffer 08%琼脂糖凝胶收集细胞:取对数期藻液 (2 ml )(2x4x106=8x106个),2500 r,3 min离心,弃上清。将沉淀转移至研钵中,锡纸包裹,-80 ℃过夜。将固体藻取出,研磨至
采用CTAB法提取植物基因组DNA并对CTAB法作了一些改进具体步骤如下:(1)将处理好的叶片至于离心管中用液氮研磨成粉末加入1ml预处理液并混匀?6000rmin离心5min后弃上清液(2)重复步骤(1)3次(3)向离心管中加入650μl?65℃预热的CTAB提取液混匀65℃水浴40min期间不时晃动(4)水浴结束后10000rmin离心6min将上清液(650μl)移入新的离心管中加入2
CTAB法提取DNA1.研磨 取2—4cm的叶片放入研钵加入CTAB溶液800μl进行研磨然后将研磨的液体转入ml的离心管中2.样品水浴56—65℃30min期间颠倒混匀数次3.在通风橱中加入氯仿800μl混匀置于离心机13000rmin离心5min4.吸取上清400μl左右转入一新的离心管中加入95无水乙醇800μl轻轻颠倒混匀5.置于离心机13000rmin离心5min去掉上清6.加75酒精静
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