为什么需要质粒转化放大某一基因 片 段 , 用于探针、 基因功能检测等。携带目的基因的重组质粒在大肠杆茵中进行表达。PCR产物的克隆和测序。构建基因库、cDNA库等。5纯化基因片段实验原理关于载体质粒质粒是一类双链、闭环的DNA 分子, 存 在 于细茵体 中,独 立 于细 茵染 色体 之 外进行复制和遗传的耕助性遗传单位。 通过改造,实验室常用质粒被赋予了以下几种特性:1含有多克隆位 点 区域,
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4 DNA亚硫酸氢盐修饰和纯化操作步骤修饰设计:使用CpGenomeTMkit使胞嘧啶转化为尿嘧啶的步骤如下。中等温度碱性pH下使DNA变性成为单链形式暴露出碱基。试剂一,一种包含亚硫酸氢根的钠盐,可使未甲基化的胞嘧啶磺化和水解脱氨,产生一种尿嘧啶磺酸盐中间产物。然后DNA在另一种盐﹙试剂二﹚存在的条件下与一种微粒载体﹙试剂三﹚结合,并通过重复离心和在70%的乙醇中重悬浮脱盐。向尿嘧啶的转化是通
实验一 流体流动阻力的测定步骤检查水箱水量液面处于距离水箱上缘约15cm高度打开水箱与泵连接管路间的阀门关闭待测管路进水阀门打开水泵电源选择实验管路1把对应的进口阀打开并在出口阀最大开度下保持全流量流动5-10min压差计排气关闭出口阀此时为零流量高扬程状态打开两个球阀(管和线之间的阀门)关闭压差计阀门345打开阀门1和2使水流经压差计关闭阀门1和2打开阀门543使压差计中的水在1atm下流出压
4 DNA亚硫酸氢盐修饰和纯化操作步骤修饰设计:使用CpGenomeTMkit使胞嘧啶转化为尿嘧啶的步骤如下。中等温度碱性pH下使DNA变性成为单链形式暴露出碱基。试剂一,一种包含亚硫酸氢根的钠盐,可使未甲基化的胞嘧啶磺化和水解脱氨,产生一种尿嘧啶磺酸盐中间产物。然后DNA在另一种盐﹙试剂二﹚存在的条件下与一种微粒载体﹙试剂三﹚结合,并通过重复离心和在70%的乙醇中重悬浮脱盐。向尿嘧啶的转化是通
免疫组化原理及步骤免疫组化操作规程 一实验原理与意义 免疫组织化学又称免疫细胞化学是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应对相应抗原进行定性定位定量测定的一项新技术它把免疫反应的特异性组织化学的可见性巧妙地结合起来借助显微镜(包括荧光显微镜电子显微镜)的显像和放大作用在细胞亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质多肽酶激素病原体以及受体等) 二实验器材 微
转化方法及其步骤: 第一步:把极坐标方程中的θ整理成cosθ和sinθ的形式 第二步:把cosθ化成xρ把sinθ化成yρ或者把ρcosθ化成x把ρsinθ化成y第三步:把ρ换成(根号下x2y2)或将其平方变成ρ2再变成x2y2 第四步:把所得方程整理成让人心里舒服的形式 例:把 ρ2cosθ化成直角坐标方程 解: 将ρ2cosθ等号两边同时乘以ρ得到:ρ22ρcosθ 把ρ2用x2y2代替
酵母单杂载体构建及实验流程(ZZY, 2016)载体构建1转录因子连接到pB42AD上。测序引物如下:pB42AD-2-F: GACTGGCTGAAATCGAATGpB42AD-2-R: CAACAACGTATCTACCAACGA2启动子连接到pLACZi2μ上。测序引物如下:pLACZi2μ-F: ATGCTTCCTTCAGCACTACCpLACZi2μ-R: ATTTATGCTACAAAG
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一、酵母感受态细胞的制备1 在YPDA培养基上接种酵母AH109菌株,培养时间≤4周,菌落直径为2-3 mm,在15 mL离心管中加入3 mL新鲜的YPDA液体培养基,每个离心管中一个菌落,30 ℃,250 rpm,8 h。2 吸取10 μL 种子菌加入到含有50 mL YPDA的250 mL 三角瓶中,30 ℃,250 rpm,16-20 h。测OD600=015-03,将培养液移至50 m
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