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ELISA的概念原理操作步骤 ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术此项技术自70年代初问世以来发展十分迅速目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域 (一) 原理 ELISA是以免疫学反应为基础将抗原抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来
Envirology ELISA试剂盒说明书试剂盒内容物:Cry1AbCry1Ac 抗体包被固相板Cry1AbCry1Ac 阳性对照组Cry1AbCry1Ac 酶结合物底物未提供的物品:TPBS清洗缓冲液( Tween-20 wash buffer)常温保存最多一年然后丢弃萃取缓冲液( Tween-20)可以将 ml Tween-20加入到100 ml 上一步的TPBS缓冲液内制得不使用时放
试剂碳酸盐包被缓冲液: 3.03g Na2CO3 6.0g NaHCO3 溶解于900ml双蒸水中检测并调整pH至9.6定容至1L PBS:1.16 g Na2HPO4 0.1 g KCl 0.1 g K3PO4 4.0 g NaCl 溶于500mL 蒸馏水中调整pH至7.4 封闭液:溶于PBS的1 BSA HYPERLINK :.labomereviewreagent
ELISA的标本准备在收集标本前都必须有一个完整的计划必须清楚要检测的成份是否足够稳定对收集后当天就进行检测的标本及时储存在4℃备用对于隔天再检测的标本及时分装后冻存在-20℃备用有条件的最好-70℃冻存备用标本应避免反复冻融?液体类标本包括血清血浆尿液胸腹水脑脊液细胞培养上清等血清:室温血液自然凝固10-20分钟后离心20分钟左右(2000-3000转分)仔细收集上清保存过程中如有沉淀形成
ELISA步骤、试剂及注意事项操作步骤方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法: 1 包被:用005M PH9牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加01ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。 2 加样:加一定稀释的待检样品01ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空
ELISA试剂及溶液配制①包被液:0.05molL碳酸盐缓冲液(pH9.6)0.75g碳酸钠1.46g碳酸氢钠加去离子水定容至500ml②0.02molL磷酸盐缓冲液(pH7.4)0.2g磷酸二氢钾2.90g磷酸氢二钠8g氯化钠加去离子水定容到1000ml③抗体稀释液:0.02molL PBS(pH7.4)0.2BSA0.2gBSA加配好的0.02molL磷酸盐缓冲液溶解定量至100g④封闭
ELISA实验步骤一览表?间接法(测抗体)双抗体夹心法(测抗原)竞争法(测抗原)抑制性测定法1包被抗原:用包被缓冲液稀释抗原至最适浓度(520μgml)各0.3ml加于微反应板每个凹孔中4℃过夜或37℃水浴23小时贮存冰箱包被抗体:用包被缓冲液稀释特异性抗体球蛋白至最适浓度(110μg ml)每凹孔加0.3ml4℃过夜或37℃水浴3小时贮存冰箱??包被特异性抗体:同左?包被抗原:同左?2?洗
ELISA基本步骤和主要试剂材料注意:本步骤为间接ELISA步骤一 主要步骤1 包被取所要包被的物质提前设计好所需浓度根据包被孔数计算所需包被物的量用包被液稀释至所需体积分加至各孔中包被条件:两种选择:一是将ELISA板直接置4℃过夜也可以先置37℃孵育2小时再转入4℃过夜2 洗涤 包被结束后弃掉包被液用PBST进行洗涤方法为PBST加满每孔静置5-10min弃掉洗液重新加满重复洗涤3
为什么需要质粒转化放大某一基因 片 段 , 用于探针、 基因功能检测等。携带目的基因的重组质粒在大肠杆茵中进行表达。PCR产物的克隆和测序。构建基因库、cDNA库等。5纯化基因片段实验原理关于载体质粒质粒是一类双链、闭环的DNA 分子, 存 在 于细茵体 中,独 立 于细 茵染 色体 之 外进行复制和遗传的耕助性遗传单位。 通过改造,实验室常用质粒被赋予了以下几种特性:1含有多克隆位 点 区域,
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