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  Western blot 技术要点：用途：定性蛋白质蛋白质表达水平测定混合样品中某蛋白的分子量抗体的特异性AtKP1抗体的特异性鉴定

• __第05章第03节3.ppt

  常见蛋白质脱盐方法：透析凝胶过滤有机溶剂、有机酸沉淀常见浓缩蛋白质的方法 盐析 超过滤 等电沉淀 冷冻干燥 聚乙二醇法讨论：下述结论对不对，为什么？1 某蛋白质样品，SDS-分析出现2条带，表明该样品一定不纯。2 某蛋白质样品，分析仅1条带，表明该样品很纯。习题蛋白质浓缩的方法SDS-测定蛋白质分子量的原理凝胶过滤测定蛋白质分子量的原理名词解释：沉降系数、免疫印迹

• _第03章第03节1.ppt

  一、氨基酸的分类二、氨基酸的酸碱化学三、氨基酸的重要化学反应四、氨基酸的光学活性和光谱性质第二节氨基酸--蛋白质的构件分子?二、氨基酸的酸碱化学 （一）氨基酸的兼性离子形式中性pH下，氨基酸主要以偶极离子（dipolarion）或兼性离子(zwitterion)形式存在。（二）氨基酸的两性解离氨基酸的解离状态是pH的一个函数氨基酸具有特征滴定曲线:存在多个拐点从滴定曲线理解：（1）pKa1解离常数

• 第03章第03节2_.ppt

  *用途: 定性或定量氨基酸（四）巯基的反应1巯基不稳定，易被氧化成二硫键2半胱氨酸?胱氨酸 2 -SH?-S-S-2与重金属反应AA－SH ＋Ag+?AA-SAg?3二硫键的打开氧化：Cys-S-S-Cys + HCOOOH?2AA-SO3- （磺基丙氨酸）还原：Cys-S-S-Cys＋?-巯基乙醇?2Cys-SH4巯基的保护巯基的烷基化试剂：碘乙酸、碘乙酰胺 －SH＋ICH2COOH?－SCH2

• 03第2章（3节）-3章（1节）.ppt

  元素碳铈2例如 要修约为四位有效数字时: 尾数≤4时舍 ------- 尾数≥6时入 ------- 尾数5时 若后面数为0 舍5成双: 若5后面还有不是0的任何数皆入: 光度法测w(Fe) 测量误差约5 则 w(Fe) = (2位) 要求称样准至3位有效数字即可.14 例: HAc在水中的离解反应 半反应1

• __第05章第02节.ppt

  第二节蛋白质的分离纯化?一、蛋白质分离提纯的一般原则高纯度、高活性、高回收率二、蛋白质的分离方法1透析（dialysis）和超滤（ultrafiltration）半透膜 （玻璃纸，火棉纸）透析常用于蛋白质溶液的除盐超滤常用于蛋白质溶液的除盐、浓缩（一）根据分子大小不同的分离方法2 密度梯度离心（density gradient ultracentrifugation）常见有蔗糖密度梯度（连续、不连

• 第08章第05节__.ppt

  第五节 核酸的性质一、核酸的水解（一）酸水解对酸敏感性：糖苷键 ? 磷酸酯键嘌呤碱糖苷键 ?嘧啶碱糖苷键（二）碱水解DNA一般对碱稳定。RNA 的磷酸酯键易被碱水解，产生核苷酸混合物。（三）酶水解（1）底物专一性ribonuclease， RNasedeoxyribonuclease，DNase（2）作用方式 核酸内切酶（endonuclease） 核酸外切酶（exonuclease）（3）断裂位

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  第五章 蛋白质III：蛋白质的性质、分离与鉴定?第一节蛋白质性质一、蛋白质的酸碱性质蛋白质等电点（pI）溶解度最小二、蛋白质分子的大小KD， kd，kD，kDa （kilodalton）寡聚蛋白质（oligometric protein）超分子复合物（supramolecularplex）蛋白质分子量可粗略估计（AA平均分子量约为110 dalton）三、蛋白质的胶体性质质点范围：1-10

• __第06章第05节.ppt

  第六节酶活性的调节酶活性的精细调节（酶分子水平）在一组系列反应中，催化第一步反应的酶往往被终产物抑制。这种抑制叫反馈抑制（feedback inhibition）。一、别构调节（Allosteric regulation）1 别构酶 (allosteric enzyme)酶分子的非催化部位与某些化合物可逆地非共价结合后发生构象变化，进而改变酶的活性状态，称为酶的别构调节。具有这种调节作用的酶叫别构

• 第06章第03节__.ppt

  ?第四节酶促反应动力学（kinetics of enzyme ）?一、底物浓度对酶反应速率的影响（一）V0－[S]曲线 1903年，Henry 提出 ES 中间络合物学说： S+E ? ES?P+E实验证据： ES复合物的电镜观察和晶体分析； E和S的共沉降（二）米氏方程（Michaelis-Menten equation）1913 年 Michaelis and Menten的假设： (1) S