单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式蛋白质的分离纯化第一节 能用作纯化依据的蛋白质性质第二节 蛋白质分离纯化的一般步骤第三节 蛋白质的分离纯化方法分离纯化蛋白质的目的: ①将蛋白质和非蛋白质杂质分离 ②将不同的蛋白质相互分离分离提纯蛋白质的要求:(1)纯度 (2)活性 (3)得率 (4)速度第一节 能用作纯化依据的蛋白质性质1
AKTA?avant系列与explore 对比一 蛋白质快速纯化工艺系统AKTA?avant?25150(一)系统设置内置压力感应器: 系统泵样品泵柱前柱后各一个 内置气泡感应器: 样品入口A泵B泵溶液入口各一个 紫外监测范围: -6到6AU 电导检测精度: ±0.01mScm 或 ±2 温度监测器范围: 0-99度精度±1.5度 (4-45度) pH监测器范围: 0-14 pH单位精度±0
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级1蛋白质的分离纯化和表征第 7 章P291一蛋白质的酸碱性质 蛋白质分子中有很多酸性和碱性解离基团是具有两性解离性质的化合物各种解离基团的解离度与溶液的pH有关pH越低碱性解离度越大蛋白质分子带正电荷越多负电荷越少pH升高则解离情况相反
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级第四节:蛋白质的重要性质及分离纯化Release proteins from cells and Differential centrifugation as a first step in protein purification蛋白质与aa一样能够发生两性解离也有等电点在等电点时(Isoelectric point pI)
离子交换层析扥原理和设备 摘要:离子交换层析(Ion?Exchange?Chromatography简称为IEC)是以离子交换剂为固定相依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法目前目前离子交换层析已成为蛋白质分离纯化中最常用的手段统计显示在蛋白质的纯化方案中使用到离子交换层析的占75其次是使用
第九章 亲和纯化技术一填空题1亲和层析洗脱方法有 2亲和力大小除由亲和对本身的 决定外还受许多因素的影响其中包括亲和吸附剂 等3亲和层析中常用作分离酶的配基有
第八节 基因工程药物的分离纯化 基因工程药物的分离纯化非常重要表达的产物都是多肽或蛋白质 它的制得具有以下 特点:①表达产物在初始料中含量较低②含有大量细胞及代谢产物③表达产物稳定性差易失活变性④表达产物的种类繁多结构不一活性各异⑤对其质量要求纯度高无菌无热原一建立分离纯化工艺的根据 ⒈含目的产物的起始料的特点 基因工程菌的发酵产物其上游过程的各种因素对分离纯化工艺有影
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级第二节 蛋白质的分离纯化?一蛋白质分离提纯的一般原则高纯度高活性高回收率二蛋白质的分离方法1.透析(dialysis)和超滤(ultrafiltration)半透膜 (玻璃纸火棉纸) 透析常用于蛋白质溶液的除盐超滤常用于蛋白质溶液的除盐浓缩(一)根据分子大小不同的分离方法2. 密度梯度离心(density gradient
Purification strategiesBy : Miss Thida ChanyachukulAIDs Production groupGeneral concepts in Purification strategiesPrinciple of purification operationsSpecial considerations in our biopharmaceuti
A Brief View of Protein Purification>>>A Brief View ofProtein Purification概 述? 蛋白质的分离纯化是研究蛋白质结构化学组成和生物功能的基础蛋白质在自然界中存在于复杂的混合体系中而且许多重要的蛋白质在细胞中的含量极低 要把蛋白质从复杂的体系中分离出来同时又要防止其组成结构的改变和生物活性的丧失显然是有相当难度的概 述细胞
单击此处编辑母版文本样式第二级单击此处编辑母版标题样式第03章 蛋白质的性质和分离纯化Properties and Purification of Protein生 物 化 学Biochemistry生命科学与技术学院 陈吉宝 蛋白质是一种两性电解质1蛋白质的酸碱性质pH=6蛋白质份子表面分布着不同的电荷蛋白质等电点:使某特定蛋白质分子上所带正负电荷相等时溶液的pH值为蛋白质的等电点(pI)蛋白