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CE Lecture 1细胞工程实验室基本实验技术 授课教师: 谢浩10/20051?Wuhan University of Science and TechnologyXie H细胞工程实验室的设置和运行都是为细胞工程服务的。10/20052?Wuhan University of Science and TechnologyXie H细胞培养的基本概念细胞培养的基本条件细胞培养的基本技术10
实验四 动物细胞传代培养一实验目的1.掌握消化法细胞传代培养的原理2.了解细胞传代培养所需专用设备试剂3.学习细胞传代培养操作二实验原理动物细胞原代培养成功细胞生长增殖形成单层细胞后会进一步扩展汇合覆盖整个培养瓶底细胞会因生存空间不足或密度过大发生接触抑制并引起营养物质枯竭和代谢产物积累发生细胞中毒影响正常生长这时需要进行分离培养细胞由原培养瓶按1:2或1:3稀释后传到新的培养瓶的过程称之
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增殖11000个细胞孔(96孔)一般5个左右重复大约能做一周孔板周围需用PBS封闭 以防蒸发MTS或CCK-8 均是100UL10UL可以混好后每孔加100ul2-4小时后测OD值从第三天开始换液以后隔天换一次克隆形成196孔每孔10个细胞(6-10个重复)24孔每孔50个细胞(容易有边缘效应3-4个重复)孔板周围用PBS封闭约10天左右染色3-4天需换一次液1. 接种一定数目的细胞于24孔培养板
细胞转染实验原理仪器试剂和操作步骤外源基因进入细胞主要有四种方法:电击法磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其进入细胞但是由于电击法和磷酸钙法的实验条件控制较严难度较大病毒法的前期准备较复杂而且可能对于细
细胞实验试题一 填空题 1 细胞生物学研究中常用的光镜有( ) ( ) ( ) ( ) ( ) 2 细胞培养一般分为( )和( )两种情况3 感光片的种类很多感色性是胶片的主要特性根据这个特性一般黑白胶片分为( ) ( ) ( ) 4 人口腔粘膜上皮细胞活体染色显示线粒体时用( )染成亮绿色 5 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察实验前
细胞传代实验操作一.实验目的 :将293FT细胞传代提供足够的细胞供实验使用二.实验原理 :细胞在培养瓶长成致密单层后已基本上饱和为使细胞能继续生长同时也将细胞数量扩大就必须进行传代三.实验材料 :293FT细胞DMEM10小牛血清D-hanks液胰酶-EDTA液四.实验步骤:293FT细胞传代:细胞培养采用DMEM10小牛血清当细胞密度达80-90的时候可以进行细胞传代具体步骤如下:弃培养瓶中培
细胞划痕实验材料:6孔板marker笔直尺20微升枪头(灭菌)无血清培养基PBS准备:所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)流程:1、先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀地划横线,大约每隔05~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。2、在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。3、第二天用枪头比着直尺
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