(6)改良的SLS(Sodium Lauroyl Sarcosine十二烷基肌氨酸钠)方法提取玉米DNA操作流程:取3-5 g新鲜的玉米叶片于15 mL离心管中,液氮速冻后用研磨棒研磨。加700 μL SLS提取液,涡旋振荡3-5 min,混匀。加700 μL酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),轻轻颠倒混匀。4℃,12,000 rpm,离心10 min。将上清转入新的离心管中,加入等体积异丙醇
实验方法:碱煮法快速粗提玉米基因组DNA实用范围:大群体交换单株的筛选,少量材料的异质性检测等相关的实验材料:充分干燥的成熟玉米种子所需试剂及设备:氢氧化钠、去离子水、浓盐酸、EDTA-Na2、Tris-base、各种量程的移液器、96孔PCR板、96孔深孔板、PCR仪、手术刀、电子天平等。相关溶液配方:01M 氢氧化钠溶液:称取40g 氢氧化钠,加去离子水500ml充分溶解后定容到1000m
Trizol法提取RNA注意:全程戴口罩,手套(PE手套,胶皮手套),离心注意放置方向。所用所有物品全部为灭RNA酶的。器材:试剂:Trizolβ巯基乙醇氯仿 75%乙醇DEPC水 TAE Buffer 08%琼脂糖凝胶收集细胞:取对数期藻液 (2 ml )(2x4x106=8x106个),2500 r,3 min离心,弃上清。将沉淀转移至研钵中,锡纸包裹,-80 ℃过夜。将固体藻取出,研磨至
采用CTAB法提取植物基因组DNA并对CTAB法作了一些改进具体步骤如下:(1)将处理好的叶片至于离心管中用液氮研磨成粉末加入1ml预处理液并混匀?6000rmin离心5min后弃上清液(2)重复步骤(1)3次(3)向离心管中加入650μl?65℃预热的CTAB提取液混匀65℃水浴40min期间不时晃动(4)水浴结束后10000rmin离心6min将上清液(650μl)移入新的离心管中加入2
CTAB法提取DNA1.研磨 取2—4cm的叶片放入研钵加入CTAB溶液800μl进行研磨然后将研磨的液体转入ml的离心管中2.样品水浴56—65℃30min期间颠倒混匀数次3.在通风橱中加入氯仿800μl混匀置于离心机13000rmin离心5min4.吸取上清400μl左右转入一新的离心管中加入95无水乙醇800μl轻轻颠倒混匀5.置于离心机13000rmin离心5min去掉上清6.加75酒精静
TPS法提取植物DNA取少量叶片置2ml管子中,加入钢珠;粉碎机粉碎加入400-500ul TPS,75℃水浴30mins;;12000rpm离心10mins;取上清加等体积异丙醇,放置-20℃ 5h以上;12000rpm离心5mins,去上清;加入200ul 75%酒精,静置10mins,离心2mins,去酒精,干燥;加50ul ddH2O,混合均匀,离心。TPS配方100ml1M(PH80
CTAB法提取水稻DNA剪取适量叶片置于20mLEppendorf管中,至于液氮中,用镊子迅速研磨成粉加入1000微升的65℃预热的CTAB提取缓冲液,65℃水浴1小时,每10-15分钟摇晃一次,使DNA充分释放出来取出离心管,加入等体积氯仿:异戊醇(24:1)混合液,上下颠倒混匀(约15次),室温下静止3分钟,使水相和有机相分层,10000rpm离心10分钟取上清至20ml Eppendor
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