免疫组化、免疫荧光、流式细胞术的应用比较及常见问题分析免疫组化(IHC)的应用介绍免疫荧光(IF)的应用介绍流式细胞术(FC)的应用介绍IHC、IF、FC区别与联系免疫组织化学原理及特点利用抗原与抗体的特异性结合原理和特殊的标记技术,通过化学反应使标记抗体显色,对组织细胞内的特异性抗原进行定位、定性、定量检测的一门技术。免疫组化具有操作简单,特异性强,敏感性高,定位准确,形态与功能相结合等特点。免
第四军医大学基础部病理学教研室免疫荧光细胞化学技术 免疫荧光细胞化学是现代生物学和医学中广泛应用的技术之一是由Coons等(1950)建立免疫荧光技术与形态学技术相结合发展成免疫荧光细胞(或组织)化学 它与葡萄球菌A蛋白(SPA)生物素与卵白素植物血凝素 (ConA等)相结合拓宽了领域与激光技术电子计算机 扫描电视和双光子显微镜等技术结合发展为定量免疫荧光细胞化学技术荧光激活细胞分类器 (FA
第四章免疫荧光细胞化学技术免疫荧光细胞化学技术(immunofluorescencecytochemistry) 采用荧光素标记的已知抗体或抗原作为探针,检测待测细胞或组织内的靶抗原或抗体,形成带有荧光素的抗原抗体复合物。利用荧光显微镜观察标本,根据组织细胞中荧光物质的存在,确定抗原或抗体的性质并定位,以及利用定量技术测定含量。荧光抗体法:用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法。 较常用荧光抗原法:用
细胞凋亡 与 免疫1引言☆细胞凋亡是一种普遍存在的生物学过程 ,它与细胞增殖、细胞分化都是最重要的生命现象,正是由于细胞增殖、细胞分化、细胞调亡的相互联系、相互制约的关系,才保证了生物体的正常发育。☆正常凋亡过程受阻或某种原因所致不正常的细胞凋亡,都会使机体出现病症。因此对细胞凋亡的研究有助于某些疾病的阐明与治疗。☆ 细胞凋亡的研究是近年来生命科学中发展起来的热点课题。早期基于形态学和生物化学,近
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方法一:首先需要把细胞养在玻璃片上(悬浮细胞需要用多聚赖氨酸包被过的玻璃片)然后在4PFA里面室温下固定30分钟PBS洗两次0.1 TX-100室温下作用1-2分钟使细胞膜通透接下来进行荧光标记需要在一个大的容器(面积大扁平状的比如大的培养皿)里面放一张用水打湿的滤纸以保持湿度剪一片合适大小的parafilm在上面滴上稀释在1BSATBS中的一抗(稀释倍数依具体抗体而定)每个玻璃片30ul足
细胞免疫荧光技术实验目的掌握免疫荧光技术的基本原理熟悉细胞免疫荧光技术的方法了解在免疫细胞化学技术中如何获得好的实验结果实验原理原位检测抗原抗体特异反应间接法 间接荧光抗体染色法示意图Hela细胞Vinculin实验用品试剂:固定液:4%PFA细胞通透:02%TritonX封闭试剂:10%正常山羊血清一抗:小鼠源抗Vinculin单克隆抗体二抗:Alexa Fluor555标记的山羊抗小鼠IgGD
免疫学实验2-----免疫荧光技术 实验目的 初步掌握免疫荧光技术的原理一般操作步骤及结果的观察方法Principle : antigen antibodyTwo necessary conditions: specificity visibilityAg-A
细胞免疫荧光实验步骤细胞免疫荧光实验步骤 简单实验步骤如下:1.漂洗血清蛋白H7.2-7.4 37度 PBS 2小时.2.-20度甲醇固定20分钟后自然干燥 10分钟3.PBS洗净:3min34.1Triton:25min-30min.配成50ultriton5mlpBS5.PBS洗净:25min6.羊血清封闭:37度20分钟7.一抗4度过夜一般要大于18小时或者37度 1-2小时8.4度
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