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蛋白质印迹(Western blotting)方法原理和优化 已有 2975 次阅读 2008-6-19 10:43 个人分类: =spaceuid=27729do=blogclassid=3273view=me 生活点滴 蛋白质印迹(Western blotting)方法原理和优化抽滤 抽滤是一种直接将蛋白质转移到膜上的方法利用真空使溶解的样品滤过膜蛋白质吸附到膜上同时样品中其它成分被真
Western Blotting朱羽桐(生物学基地班)摘要: Western Blotting是将经电泳分离后的蛋白质转移并固定在化学合成膜(常用的是硝酸纤维素膜和尼龙膜)的支持物上然后以特定的亲和反应免疫反应或结合反应以及显色系统分析此印迹此法用于检测材料中某种蛋白质的相对含量本实验采用人血清为材料对此样品进行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后用电转移法将蛋白质转印到硝酸纤维素薄膜
Western Blot中文一般称为蛋白质印迹它是分子生物学生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息 HYPERLINK :baike.baiduimage8474fbddadafbafc77c63876 o 查看图片
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单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级Western印迹实验目的实验原理 Western印迹杂交法是利用特异性抗体做探针对附着于固相支持体上的某些特异性蛋白进行鉴别和定量的方法它具有固相操作简便及不必对细胞进行放射性预标记
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【实验目的】 了解蛋白质印迹法的基本原理及其操作和应用 【实验原理】 蛋白质印迹法又称为免疫印迹法这是一种可以检测固定在固相载体上蛋白质的免疫化学技术方法待测蛋白既可以是粗提物也可以经过一定的分离和纯化另外这项技术的应用需要利用待测蛋白的单克隆或多 HYPERLINK =ArticleField=TitleKeyword=克隆 克隆抗体进行识别 如图所示可溶性抗原也就是待测蛋白首先要根
蛋白质组学实验技术流程1蛋白提取目的:尽可能多的将植物组织中蛋白质提取出来。11 试剂和溶液(1)匀浆缓冲液本实验室蛋白质提取常用的匀浆缓冲液有两种:1)Tris-HCl 匀浆缓冲液;2)磷酸(PBS)匀浆缓冲液。Tris-HCl匀浆缓冲液:20 mM(m mol/L) Tris-HCl (pH 75),250 mM蔗糖,10 mM EDTA,1 mM PMSF(使用前加入),1 mM DTT
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