单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级荧光定量PCR技术讲座------分子生物学实验技术系列讲座Ⅲ张志坤 20100910大纲一荧光定量PCR技术的基础理论二引物及Taqman探针的设计三内参基因的选择四反应体系的优化五实验方案的选择六误差分析及操作规范七实验中污染的防控八实验结果的分析一荧光定量PCR技术的基础理论1荧光定量PCR技术概论 荧光定
利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化最终精确地对起始模板定量分析阈值(Xn):荧光扩增曲线指数扩增期的荧光强度标准(PCR扩增产物量的标准)C(t)值(n):荧光信号(扩增产物)到达阈值时所经过的扩增循环次数常用荧光检测方法SYBR非特异性TaqMan特异性与扩增的片断配对熔解曲线分析定量和检测目标基因双标准曲线法结果精确对扩增效率要求不高构建目标基因与内标基因的标
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO.LTD―qPCR系统从RNA提取到荧光定量PCR解决方案内容概要荧光定量PCR的原理荧光定量PCR的标记方法荧光定量PCR解析方法 SYBR法实验流程及注意事项 TIANGEN荧光定量产品选择指南实时定量PCR技术:利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循
实时荧光定量PCR技术的原理及应用(Real time Quantitative PCR)北京天为时代科技有限欧阳志荃2005-06-02天为时代核酸系列讲座之南京农业大学讲 座提纲 实时荧光定量PCR原理 实时荧光定量PCR的几种方法介绍 实时荧光定量PCR医学和科研中的应用 实时荧光定量PCR原理 实时荧光定量PCR的几种方法介绍 实时荧光定量PCR医学和科研中的应用实时荧光定量PCR定义
荧光定量PCR 技术参数一 配置要求包括仪器主机电脑软件及试剂能够完成绝对定量相对定量基于 MGB 原理的高成功率SNP分析和熔点曲线分析二技术规格孔通量加热冷却方式为Peltier半导体控温2.温度范围℃3.可以升级至快速模式(40分钟内完成常规96孔板的扩增与检验)或者升级 HRM 模块4.反应体积为20-100uL5.激发光源为卤钨灯配备时间监测及自我诊断程序6.检测器为CCD实时动态
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Real-time PCR for mRNA quantitation一、原理实时荧光定量PCR技术是通过检测PCR产物中荧光讯号强度来达到定量PCR产物的目的,目前该技术已在动植物基因工程,微生物和医学领域中得到广泛应用。实时定量PCR包括探针法和染料法两种,探针法是利用与靶序列特异杂交的探针来指示扩增产物的增加,特异性高,如Taq ManTM技术;染料法则是利用染料来指示扩增的增加,特异性
实时荧光定量PCR技术的原理及应用(Real time Quantitative PCR)讲 座提纲 实时荧光定量PCR原理 实时荧光定量PCR的几种方法介绍实时荧光定量PCR原理 实时荧光定量PCR的几种方法介绍 实时荧光定量技术的应用实时荧光定量PCR定义在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法 实时荧光定量PCR 原
miRNA实时荧光定量PCR实时荧光定量PCR从1996年美国Applied Biosystems推出实时荧光定量PCR技术以来该技术已经越来越广泛的应用到各类RNA的研究中成为研究RNA必不可少的实验手段之一目前比较常用的方法有两种:(1)TaqMan荧光探针法:该方法在特异性探针的两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团当探针完整时荧光基团发光被淬灭基团吸收在PCR扩增过程中探针被降
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